王 丹 ， 田春艳 ， 陈桂生 ， 亓 琪 ， 李海洋 ， 田彩红

    (1.宁夏医科大学临床学院，银川 750004； 2.宁夏颅脑疾病重点实验室，银川 750004； 3.宁夏银川市第三人民医院，银川 7500044； 4.宁夏医科大学总医院神经内科，银川 750004)

    全国第三次死因回顾抽样调查报告指出，脑卒中是我国目前第一死亡及成年人首位致残的原因，同时是全球第二大致死因素、第一大致残因素[1-2]，缺血性脑卒中占脑卒中的 70%～80%，是严重危害人类健康的疾患。缺血性脑血管疾病的研究方法多种多样，利用动物模型比较接近于疾病的病理状态，但由于动物实验周期长、样品量大、花费高、个体差异大，动物模型的制备具有一定难度，从而限制了其应用[3-5]，由于原代培养海马细胞污染率高，建立缺氧/复氧模型存在一定困难，因此小鼠海马神经元细胞(HT22细胞)成为体外细胞实验的良好选择。而体外实验采用细胞培养，利用化学或物理干预措施模拟人体缺血缺氧状态更为便捷，因此细胞缺氧/复氧损伤模型被广泛地应用于神经细胞缺血缺氧损伤的研究[6]。目前公认细胞缺氧合并培养基缺糖能造成体内缺血模型[7]，连二亚硫酸钠(Na2S2O4)是一种氧清除剂，可有效清除细胞培养基质中的氧，且并不会损伤细胞膜[8-9]，且有研究报道[10]，2 mmol·L-1Na2S2O4溶液可保持无氧状态1 h左右，溶液的pH值并无变化，但利用Na2S2O4建立HT22细胞缺氧/复氧模型的文章鲜见报道。因此，本研究应用Na2S2O4建立HT22细胞的缺氧/复氧模型，以HT22细胞形态变化和损伤情况为指标，以期建立一种稳定的HT22细胞拟缺氧性损伤模型。

    1 材料与方法

    1.1 实验材料

    HT22细胞(宁夏颅脑重点实验室提供)。

    1.2 主要仪器及试剂

    超净工作台(SW-CJ-1F型 ......