赵 帅，陈冬梅，2，虎 娜，杨张杰，王宇欣，马会明

    (1.宁夏医科大学生育力保持教育部重点实验室，银川 750004；2.宁夏医科大学总医院干细胞研究所，银川 750004)

    多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome，PCOS)是育龄期女性最为常见的内分泌紊乱和代谢异常性疾病之一，育龄妇女发病率6%～21%，是女性不孕的主要原因之一[1]。PCOS中颗粒细胞增殖和凋亡异常以及颗粒细胞与卵母细胞间的缝隙连接或旁分泌通讯功能受限，都会导致PCOS卵泡发育障碍，并影响排卵和黄体生成。有文献报道[2]，卵巢颗粒细胞增殖和凋亡在促进卵泡发育功能、卵母细胞的成熟以及合成和分泌卵泡抑制素(follicle stimulating hormone，FSH)、雌激素和黄体生成素(luteinizing hormone，LH)等方面均具有重要作用。因此，增强卵巢颗粒细胞的增殖能力、降低凋亡率的作用可改善卵母细胞生长和成熟的微环境，同时也为卵母细胞的生长、发育、募集以及排卵过程提供营养物质，进而改善PCOS的卵巢功能。

    β-谷甾醇(β-sitosterol)是一种天然多酚羟酸类化合物，属于甾醇类成分中的主要成分之一，β-谷甾醇通过多靶点、多途径发挥抗氧化、抗炎、抗凋亡和神经保护等生物学活性[3]。β-谷甾醇可通过增加癌细胞凋亡来抑制肝癌、肺癌、胃癌、乳腺癌，在人白血病细胞中表现出显著的抗诱导凋亡活性的作用[4-7]。β-谷甾醇可下调ERK1/2和上调Bcl-2/Bax抑制心肌细胞凋亡[8]。有研究发现[9]，PI3K/AKT/GSK3通路在PCOS发病机制中发挥重要作用。IGF1R/PI3K信号通路主要在卵巢颗粒细胞中发挥作用[10]。目前，有关PCOS排卵障碍中卵泡发育延迟和排除受阻的发病机制与颗粒细胞增殖、凋亡和分泌密切相关。因此，需要通过解决颗粒细胞增殖缓慢和凋亡增加的问题，以改善PCOS卵巢排卵障碍的状态。然而，β-谷甾醇抗凋亡、促增殖的特点是否对颗粒细胞具有具体作用也尚未有文献报道。本研究拟通过检测β-谷甾醇对卵巢颗粒细胞的增殖与凋亡及其对PI3K/AKT信号通路相关表达的影响，为PCOS卵泡发育障碍的机制研究提供实验依据。

    1 材料与方法

    1.1 实验材料

    1.1.1 主要细胞株 人卵巢颗粒细胞系(KGN)由宁夏医科大学生育力保持教育部重点实验室保存。

    1.1.2 主要药物和试剂 β-谷甾醇(MCE公司)，P-PI3KCA抗体(Affinity公司) ......