沉默信息调节因子1通过调节LEF-1对软骨保护作用的研究
中度,胫骨,1资料与方法,1一般资料,2所用材料,3组织处理及分组,4苏木精-伊红(HE)和番红O固绿染色观察人膝关节胫骨平台软骨组织病理改变,5免疫组织化学检测胫骨软骨组织中SIRT-1,β-cate
胡学宇,杨小春,,薛 源,燕江波,周 永,金群华(1.宁夏医科大学临床医学院,银川 750004;2.宁夏医科大学总医院,银川 750004)
骨关节炎(osteoarthritis,OA)是一种慢性退行性疾病,可累及关节软骨、软骨下骨、半月板、滑膜及周围软组织[1]。其典型特征是关节软骨退变,软骨下骨骨重塑及滑膜炎性改变[2]。软骨覆盖于关节表面,起润滑和支撑作用,主要由软骨细胞和细胞外基质(extracellular matrix,ECM)组成。软骨细胞负责ECM成分的分泌和更新,ECM反过来对软骨细胞起营养支持作用。当软骨由于磨损或机械应力造成软骨破坏,将会引起关节疼痛、肿胀及炎症反应[3],ECM随之丢失,其合成代谢和分解代谢的平衡被打破,造成骨关节炎的发生。沉默信息调节因子1(silent information regulator 1,SIRT-1)作为烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)依赖性的Ⅲ类组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylase,HDAC),其对细胞生长、代谢、衰老及炎症方面有重要作用[4]。在Wnt/β-catenin信号通路中,SIRT-1可发挥软骨保护作用从而达到治疗骨关节炎的作用[5]。淋巴细胞增强因子1(lymphoidenhancer factor,LEF-1)作为T细胞因子(TCF)/LEF家族中成员[6],主要位于细胞核中,是Wnt信号通路中重要的调节因子。LEF-1参与调控多种疾病及代谢过程的发生[7-8]。β-catenin与LEF-1蛋白相互作用可稳定细胞质中β-catenin表达水平,在Wnt信号通路作用下,β-catenin被稳定转运到细胞核内,与LEF-1结合后,调控目的基因的表达。研究显示[9],β-catenin参与调节软骨的保护,减轻关节软骨的破坏与变性。为观察在骨关节炎发生时,SIRT-1是否参与调节LEF-1蛋白的表达来发挥软骨保护作用,进行了本研究。
1 资料与方法
1.1 一般资料
选取2020年2—7月宁夏医科大学总医院骨三科收治的原发性骨关节炎患者行全膝关节置换手术后自愿捐赠的新鲜胫骨平台组织,共30例,其中女性18例,男性12例,排除类风湿、创伤等引起的继发性关节炎。所有实验均获得宁夏医科大学总医院伦理委员会的批准(批准文号-2020-999),并取得患者家属的知情同意且符合赫尔辛基原则。
1.2 所用材料
组织固定液(索莱宝,北京);番红O固绿染料(索莱宝 ......
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