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编号:1486751
甘草酸对高糖诱导的小鼠肾小球系膜细胞T G F-β1/S m ads信号通路的影响
http://www.100md.com 2021年6月24日 宁夏医科大学学报 2021年第4期
1材料与方法,1实验材料与仪器,2细胞培养及实验分组,3CCK-8法检测细胞活性,4HE染色观察细胞形态,5Westernblot检测细胞中TGF-β1,P-Smad3,P-S
     冉 喆,王玉军,王 珍,赵天琪,侯绍章

    (宁夏医科大学基础医学院病理学系,银川 750004)

    糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)是糖尿病最常见的微血管并发症之一,国际糖尿病联盟组织近日调查显示,在我国有20%~40%的糖尿病患者并发DN[1]。与系膜细胞增殖相关的细胞外基质(extracelluar matrix,ECM)积聚是DN的主要病理变化之一,在DN病变初期,活化的肾小球系膜细胞即发生增殖,并分泌大量细胞因子影响ECM合成、分解平衡,逐渐引起ECM大量沉积,导致肾小球硬化、肾纤维化的形成[2-3]。因此,对肾小球系膜细胞功能的监测在糖尿病肾病的早期诊断和治疗中具有重要意义。在众多影响肾纤维化的信号通路中,转化因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)/Smads信号通路是诱导肾纤维化进程中最重要的信号通路[4],高糖刺激可以导致肾小球系膜细胞TGF-β1表达增加,引起下游受体调节Smads(R-Smads)的激活,进而增加ECM相关蛋白的表达,并抑制ECM的降解,导致肾脏纤维化[5]。因此,通过阻断TGF-β1-Smads信号通路可以有效预防DN的进展。近年来,甘草酸(glycyrrhizic acid,GA)在抗肾纤维化及DN保护领域取得了长足进展,得到了广大学者的认可。Hou等[6]研究发现,在糖尿病大鼠模型中,GA可以通过抑制氧化应激对DN起防治作用。GA也可以通过提高Mn-SOD的表达减缓高糖诱导的肾小管上皮细胞损伤[7]。然而,GA对于高糖诱导的肾小球系膜细胞的影响及其作用机制尚未明确。因此,本实验通过高糖诱导的肾小球系膜细胞模拟体内环境,观察GA对TGF-β1-Smads信号通路蛋白表达的影响,以探讨GA对DN肾脏保护作用机制,为GA在商业领域的应用和推广提供理论依据。

    1 材料与方法

    1.1 实验材料与仪器

    MCs SV40 MES13细胞购自武汉普罗塞尔公司(中国),胰蛋白酶EDTA(钙二钠)、胎牛血清(FBS)购自Hyclone实验室公司(美国),D-葡萄糖粉末购自Sigma(美国),BCA蛋白测定试剂盒购自上海碧云天生物工程研究所(中国) ......

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