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编号:1486723
人脂肪源性血管外膜细胞对CD34+造血干/祖细胞体外支持的实验研究
http://www.100md.com 2021年6月22日 宁夏医科大学学报 2021年第5期
共培养,细胞因子,干细胞,1材料与方法,1细胞与试剂,2实验方法,3统计学方法,2结果,1不同培养体系共培养后UCBCD34+HSPCs形态变化,2不同培养体系共培养后UCBCD34+HSPC
     周 芮,杨婷婷,张 磊,许 飞,郑 波

    (1.宁夏医科大学,银川 750004;2.宁夏人类干细胞研究所,银川 750004;3.宁夏医科大学总医院血液内科,银川 750004)

    造血干细胞移植是治疗多种难治性血液系统疾病的有效手段,造血干细胞与骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)共输注成功促进体内造血重建已有报道[1]。大量研究[2-3]表明,BMSCs不但参与骨髓造血微环境构成,并能在特定条件下分化为造血基质细胞,产生具有多种调节造血作用的细胞因子从而改善造血微环境,促进造血干细胞/祖细胞(hematopoietic stem/progenitor cells,HSPCs)增殖分化。然而,BMSCs不易获取,难以进行有效分离纯化等问题影响了移植的疗效。因此,寻找替代细胞将是再生医学急需解决的问题。

    血管外膜细胞(pericyte/perivascular cells,PCs)被认为是间充质干细胞的前体细胞,是一种沿着人体组织器官的小血管广泛分布,且高表达CD146标记的细胞群[4-5]。研究发现,PCs与BMSCs不仅在组织再生和分化潜能等方面存在相似性[6],还能够在血管发育和调节微循环稳态方面发挥重要作用[7-8],Corselli等[9]进一步发现,髓外脂肪组织来源的PCs能够通过细胞间接触激活Notch通路来重构异位造血微环境,从而支持免疫缺陷小鼠HSPCs移植后长期存活。脂肪组织是人体分布最为广泛的组织器官之一,脂肪来源的细胞具有自我更新能力强和高增殖率的特点[10],并且能够分泌多种支持HSPCs增殖和分化的正性因子[11-12],如胰岛素样生长因子-1和转化生长因子-β1等,是相关造血细胞的理想来源。但人脂肪源性血管外膜细胞(human adipose-derived pericyte/perivascular cells,hAD-PCs)是否能够体外支持UCB CD34+HSPCs生长国内尚未见报道,本文通过直接接触共培养,探究hAD-PCs对UCB CD34+HSPCs在维持体外生长、造血细胞表面抗原表达及集落形成等方面的潜能,评估hADPCs对UCB CD34+HSPCs的体外支持效力。

    1 材料与方法

    1.1 细胞与试剂

    大网膜脂肪标本来源于减重患者胃切除手术术中切除大网膜脂肪组织(n=5),脐血标本来源于宁夏医科大学总医院产科剖宫产手术足月新生儿(n=10),患者及家属签署知情同意书并获得宁夏医科大学总医院伦理学委员会批准 ......

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