孙 琪，王 华，郭 维

    (1.宁夏医科大学中医学院，银川 750004；2.宁夏少数民族医药现代化教育部重点实验室，银川 750004)

    中国的胃癌发病率在全球占比约40%[1]。尽管近年来死亡率有降低趋势[2]，但由于发病人数增加，胃癌依然是严重影响人民健康的恶性疾病。中药治疗胃癌能体现增效减毒，提高免疫力，改善患者生存质量等优势作用。中医理论提出胃的生理病理有两个主要特点，即“脾胃为生痰之源”“六腑以通为用，以降为顺”。基于此，本文胃癌的核心病机为“痰浊阻滞，腑气不通”，提出采用“化痰通腑法”治疗胃癌。临床中以“消痰散结方”为基础结合个人经验拟定“涤痰荡瘤汤”，该方由半夏、天南星、瓜蒌、酒大黄等药物组成，有化痰散结、通腑降气之功。临床中运用该方治疗胃癌取得较好效果，能明显改善患者症状及生活质量。

    microRNA在胃癌发病过程中发挥了重要调控作用，在消化道肿瘤中microRNA-506-3p显示低表达状态，通过提高其表达可抑制肿瘤生长，对肿瘤防治有重要意义[3-4]。microRNA-506-3p可通过靶向调控胞外信号调节激酶2(ERK2)/E26转录因子1(ETS1)/基质金属蛋白酶9(MMP9)通路，进而调控肿瘤细胞的增殖和转移[5]。上述这些研究结果提示microRNA-506-3p及其调控的ERK2/ETS1/MMP9信号通路可能是药物作用的靶点。为深入阐明涤痰荡瘤汤有效抑制胃癌细胞的增殖和迁移的作用机制，本文探讨涤痰荡瘤汤对人胃癌细胞裸鼠胃原位移植瘤的抑瘤作用及其对microRNA-506-3p和ERK2/ETS1/MMP9信号通路的影响。

    1 材料与方法

    1.1 实验材料

    1.1.1 主要试剂及药物 涤痰荡瘤汤药物组成：清半夏15 g，天南星15 g，瓜蒌9 g，酒大黄3 g，浙贝10 g，生牡蛎30 g，全蝎6 g，地龙6 g，守宫6 g，海螵蛸15 g，甘草9 g。上方制成浓度为0.81 g·mL-1的水煎剂(该浓度由人与小鼠给药剂量换算所得，前期预实验中通过MKN45细胞胃癌原位移植瘤模型证明该浓度为最佳抑瘤浓度，因此本实验所用中药均采用此浓度，具体见表1。由宁夏医科大学附属回医中医医院提供；注射用5-氟尿嘧啶(5-FU)(上海旭东海普药业有限公司)。

    microRNANA荧光定量试剂盒(SYBR Green)购自北京天根公司；ETS1 Antibody(66598-1-Ig)、MMP9 Antibody(10375-2-AP)、Anti-β-Actin Mouse Monoclonal Antibody(66009-1-Ig)购自武汉三鹰生物技术有限公司；Erk2 Antibody(9108)购自德国CST公司；Goat anti-Mouse IgG Secondary Antibody HRP conjugated(L3032)、Goat anti-Rabbit IgG Secondary Antibody HRP conjugated(L3012)购自艾克索生物科技股份有限公司；ECL发光液(RPN2232)购自美国GE公司；全蛋白提取试剂盒、BCA蛋白含量检测试剂盒购自南京凯基公司；蛋白Marker购自美国Thermo公司 ......