刘丽媛， 曹彩霞， 蒋 丹， 屈昱良， 贾咏存

    (1.宁夏回族自治区人民医院临床检验诊断中心，银川 750001； 2.宁夏医科大学临床医学院，银川 750004)

    羊水过少是一种常见的妊娠并发症，会引起包括胎儿结构异常、生长受限以及各种出生后综合征[1]。羊膜作为胎膜的组成部分，在维持羊水平衡中具有重要的作用，胎膜与羊水的吸收和母体与羊水的物质交换有密切的关系。此外，母体妊娠期间接触的各种不良外界环境也会导致羊水过少[2]。苯并[a]芘(benzo[a]pyrene，BaP)作为多环芳烃类的代表化合物广泛存在于工作场所以及各种生活环境中，且可经口鼻等多种途径进入人体[3]，可导致不育且影响女性生殖健康[4-5]，母体内高水平的BaP 代谢物可增加早孕期流产风险[6]。BaP 经代谢活化酶细胞色素P450 1A1(cytochrome P450 1A1，CYP1A1)作用形成7，8-氢二羟基-9，10-环氧化苯并[a]芘(benzo[a]pyren-7，8-dihydrodiol-9，10-epoxide，BPDE)，干扰细胞内正常的信号通路，最终导致基因突变[7]。水通道蛋白(aquaporins，AQPs)普遍存在于与液体分泌和吸收有关的上皮细胞和内皮细胞，介导大量水快速被动地跨膜转运，是水进出细胞的主要途径[8]。其中水通道蛋白-8(AQP-8)[9]是存在于人羊膜上皮细胞上的主要蛋白。BaP 是否会改变调控羊水平衡的效应基因AQP-8 的表达鲜有报道，本研究旨在研究BaP 对人羊膜上皮细胞上AQP-8的表达影响及其作用机制。

    1 资料与方法

    1.1 主要试剂

    BaP(美国sigma 公司)，兔抗人AQP-3、AQP-8、蛋白激酶A(PKA)、T-AKT、p-AKT、CYP1A1(南京bioworld 公司)，鼠抗人GAPDH(美国sigma 公司)，二抗羊抗兔lgG、羊抗小鼠lgG(北京中杉金桥生物技术有限公司)，MTT 细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒(上海碧云天生物技术有限公司)，人环磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate，cAMP)(ELISA)试剂盒(英国abcam 公司)。

    1.2 方法

    1.2.1 标本收集 选取2018 年9 月至2019 年12 月宁夏回族自治区人民医院门诊患者，所有病例均经本院伦理委员会批准，纳入本研究的产妇均知情并签署知情同意书。所有病例均无糖尿病、高血压、胎儿畸形、胎儿生长受限、胎儿窘迫、胎膜早破、自身免疫疾病等妊娠合并症和并发症 ......