葛爱娟，王小红，叶 红

    (中国人民解放军联勤保障部队第904医院妇产科，无锡 214000)

    宫颈癌是常见的妇科恶性肿瘤，其发病率仅次于乳腺癌，并在世界范围内明显上升[1]。据统计[2]，全球每年约有46.6万宫颈癌新发病例。我国每年估计新发宫颈癌病例13.5万，约占全世界新发人数的28.7%。因此，早发现早治疗尤为重要。微小RNA(microRNAs，miRNA)是一类长度为19～25个核苷酸的非编码RNA分子，能通过与靶基因的3'-非翻译区结合来调节基因表达[3]。越来越多的证据[4-5]表明，miRNA在肿瘤细胞增殖、凋亡、侵袭及转移等过程中发挥着重要作用。miR-612是一类位于11号染色体上的miRNA，并在几种人类癌症中存在异常表达[6-8]，如膀胱癌、肝癌、胃癌等。然而，miR-612在宫颈癌中的作用尚未报道。为此本文研究了miR-612在体外对宫颈癌细胞恶性生物学行为的影响，以此为临床早期诊治宫颈癌提供科学依据。

    1 材料与方法

    1.1 主要试剂

    人宫颈癌SiHa细胞系(上海通派生物科技有限公司)；氯仿、异丙醇、乙醇(上海化学试剂有限公司)；实时荧光定量PCR(qRT-PCR)试剂、cDNA Reverse Transcription kit、RNAiso plus(D9108A)Trizol(大连宝生物Takara公司)；DMEM培养基(上海索莱宝生物科技有限公司)；青链霉素、胎牛血清、DMSO、0.25%胰酶消化液(美国Gibco公司)；Lipofectamine2000[赛默飞世尔科技(中国)有限公司]；miR-612 mimic、miR-612 minic-NC(广州市锐博生物科技有限公司)；CCK-8试剂盒(上海东仁化学科技有限公司)；PI染液、Matrigel(美国BD公司)；Transwell小室(美国Millipore公司)；结晶紫(美国Sigma公司)。

    1.2 主要仪器

    高速低温离心机(德国Eppendorf公司)、ABI7500 PCR仪器(美国Applied Biosystems公司)、PCR扩增仪(美国Life Technologies公司)、超净工作台(新加坡Esco公司)、二氧化碳(CO2)培养箱(美国Thermo Electron Corporation公司)、SpectraMax M5酶标仪(美国Molecular Device公司) ......