STING在氟氯氰菊酯诱导大鼠睾丸损伤中的作用
试剂盒,1材料与方法,1实验试剂,2实验动物与分组,3检测方法,4统计学方法,2结果,1氟氯氰菊酯对大鼠睾丸损伤的影响,2细胞损伤及氧化应激损伤指标检测结果,3氟氯氰菊酯染毒大鼠后对睾丸中STING和炎症的影响
马利亚,赵 吉,李晓玉,谢永鑫,郭 新,杨惠芳(1.宁夏医科大学公共卫生与管理学院,银川 750004;2.宁夏医科大学环境因素与慢性病控制重点实验室,银川 750004)
农药有导致免疫力下降、诱发慢性疾病、引起肝脏病变及致癌致畸致突变的危害[1]。本课题组前期对银川市近郊蔬菜大棚内农药残留进行检测,发现氟氯氰菊酯的检出率最高[2]。氟氯氰菊酯可对人类构成潜在健康威胁,其暴露可引起神经和生殖系统损伤[3-6]。研究[7-8]发现,拟除虫菊酯可降低精子的浓度、质量以及破坏精子DNA,还可引起成年男性的生殖损伤。本课题组前期研究[9]发现,暴露于氟氯氰菊酯可抑制大鼠睾丸抑制素B(INHB)的表达。INHB由生殖系统细胞分泌,是睾丸生精的主要标记物,反映男性睾丸生精能力[10]。表明氟氯氰菊酯对大鼠睾丸具有一定的毒性作用,但其作用机制尚不明确。
干扰素刺激基因(STING)是在研究天然免疫信号通路过程中发现的新型接头蛋白,在机体抗感染、炎性反应及抗肿瘤等方面都发挥了重要作用。在创伤性脑损伤中,STING表达上调导致促炎性细胞因子表达增加,自噬减少[11]。STING在氟氯氰菊酯所致大鼠睾丸损伤中的机制尚不明确。本研究探讨STING在氟氯氰菊酯诱导大鼠睾丸损伤中的作用,确定农药暴露早期生物标记物,以期为人群健康危险度评估提供基础资料,并为其预防和救治提供一定参考依据。
1 材料与方法
1.1 实验试剂
氟氯氰菊酯(英国Dr.Ehrenstorfer公司);金龙鱼牌玉米油;丙二醛(MDA)试剂盒(北京Solarbio公司)、超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒(南京建成生物研究所)、乳酸脱氢酶(LDH)检测试剂盒(北京Solarbio公司);BCA蛋白检测试剂盒(江苏凯基公司);全蛋白提取试剂盒、SDS-PAGE凝胶配制试剂盒(上海碧云天公司);STING一抗(美国Abcam公司);白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、GAPDH一抗(中国Affinity公司);蛋白Marker(Thermo公司);TRIzol(Invitrogen公司);引物由上海生工合成。
1.2 实验动物与分组
40只SPF级雄性Wistar大鼠,体质量270 g左右,购自辽宁昌盛生物技术有限公司,动物合格证号:SCXK(Liao)2015-0001。大鼠饲养于标准动物房,环境温度(22±2)℃,相对湿度为60%~70%,光照(8:30~20:30)和黑暗(20:30~8:30)交替保持12 h ......
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