刘 平，程莹莹，蔡海燕，杨 森，武建军，丁银秀，3

    (1.宁夏医科大学基础医学院人体解剖学系，银川 750004；2.宁夏回族自治区人民医院神经内科，银川 750001；3.宁夏回族自治区医学科学研究所，银川 750004)

    颞叶癫痫是最常见的难治性癫痫[1]。癫痫发作时引起的海马神经发生与癫痫易感性、继发性海马功能障碍等密切相关，其具体机制不明。研究[2-3]证实，反复的癫痫发作或癫痫持续状态(status epilepticus，SE)下，严重影响动物的学习记忆等认知功能，且癫痫发作后引起海马萎缩和苔藓样出芽，进一步加重了动物认知功能减退。经典的Wnts/β-catenin信号通路是参与脑内神经发生、癫痫形成的关键途径[4]。因此，阐明癫痫发作时海马神经发生与Wnts/β-catenin信号网络调控机制的关系，对癫痫的靶向防治尤为重要。本实验以SD癫痫大鼠为研究对象，探讨SD大鼠癫痫发作后海马区胶质纤维状酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein，GFAP)、Wnt3a、p-β-catenin和β-catenin表达的变化情况。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物及分组

    选取体质量为150～180 g的雄性SPF级SD大鼠32只，由宁夏医科大学实验动物中心提供。动物饲养室内的温度保持在20℃左右，相对湿度恒定(45%～55%)。常规摄食、饮水，让大鼠适应环境3 d后，进行后续的实验。将大鼠随机分为正常对照组(Con组)、癫痫模型组(SE 1 d、SE 7 d和SE 14 d)共4组，每组SD大鼠8只。

    1.2 主要试剂和仪器

    氯化锂、匹罗卡品购自Sigma公司；兔抗GFAP、兔抗Wnt3a、兔抗p-β-catenin和兔抗β-catenin购自Abcam公司；总蛋白提取试剂盒、BCA蛋白定量试剂盒、SDS-PAGE凝胶配制试剂盒以及相应的HRP二抗购自凯基生物公司；高速冷冻离心机购自Thermo Fisher公司 ......