甘草甜素抑制PI3K/AKT/AR 通路诱导人前列腺癌C4-2B 细胞凋亡
孵育,依赖性,1材料与方法,1细胞株,2试剂,3方法,4统计学方法,2结果,1GLY剂量依赖性抑制C4-2B细胞增殖能力,2GLY对C4-2B细胞数目及形态影响,3GLY剂量依赖性抑制
杨博雅, 赵瑞宁, 王振位, 李佳鑫, 秦凯悦,郭凤英, 勉昱琛, 聂黎虹(1.宁夏医科大学基础医学院,银川 750004; 2.宁夏医科大学总医院泌尿外科,银川 750004)
前列腺癌是一种最常见的男性恶性肿瘤,在世界范围内其发病率位列男性恶性肿瘤第二位[1]。近年来我国前列腺癌发病率呈上升趋势,已成为我国发病率增长最快的恶性肿瘤之一[2]。多数前列腺癌患者确诊时已发展至中晚期,经雄激素剥夺治疗(androgen deprivation therapy,ADT)18~36个月后,几乎均会发展为去势抵抗性前列腺癌(castration-resistant prostate cancer,CRPC),其患者预后更差[3]。因此,靶向CRPC 寻找有效防治前列腺癌的药物显得尤为重要。
甘草甜素(glycyrrhizin,GLY)为从甘草根茎中提取的三萜类化合物,是一种安全无毒的天然产物,在抗癌、抗炎及抗病毒等方面具有广泛的药理作用[4]。但GLY 是否可抑制CRPC 阶段的前列腺癌细胞及其机制目前鲜有报道。本研究采用不同浓度GLY 干预人前列腺癌C4-2B 细胞,探讨其对C4-2B 细胞增殖与凋亡的影响及可能机制,以期为丰富CRPC 临床治疗提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 细胞株
实验所用的人前列腺癌细胞株C4-2B 由US California 大学Davis 分校Allen C.Gao 教授惠赠。
1.2 试剂
GLY 购自东京化成工业株式会社;胰蛋白酶、青霉素、链霉素购自北京索莱宝科技有限公司;胎牛血清(FBS)、磷酸缓冲盐溶液PBS、RPMI 1640 培养基购自Biological Industries 公司;CCK-8 试剂盒购自上海贝博生物科技有限公司;全蛋白提取试剂盒、BCA 蛋白定量试剂盒购自江苏凯基生物科技公司;兔抗B 淋巴细胞瘤2(Bcl-2)、兔抗Bcl-2 相关蛋白X(Bax)、兔抗裂解型胱天蛋白酶3(c-Caspase3)、兔抗磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)、兔抗磷酸化磷脂酰肌醇-3-激酶(p-PI3K)、兔抗蛋白激酶B(AKT)、兔抗磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)、兔抗雄激素受体(androgen receptor,AR)购自Proteintech 公司;鼠抗β 肌动蛋白(β-Actin)多克隆抗体、HRP 标记的山羊抗小鼠IgG、HRP标记的山羊抗兔IgG 购自北京中杉金桥公司;渥漫霉素(WM)购于APExBio 公司;ECL 发光液购自北京赛文公司 ......
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