王振位， 聂黎虹， 杨博雅， 刘子洋， 甄 旭， 赵瑞宁

    (1.宁夏医科大学总医院泌尿外科，银川 750004； 2.宁夏医科大学基础医学院，银川 750004； 3.宁夏医科大学临床医学院，银川 750004)

    前列腺癌(prostate cancer，PCa)是男性好发恶性肿瘤，在全球范围内，其发病率与病死率分别位居男性恶性肿瘤的第2 位和第5 位，严重危害中老年男性健康[1]。PCa 进展的主要方式由雄激素受体(androgen receptor，AR)信号通路介导，因此干扰该信号通路的功能一直是治疗晚期PCa 的重要措施之一，如雄激素剥夺治疗、AR 阻断治疗等[2]。上述治疗措施仅在初期具有显著疗效，一般3 年左右演变成去势抵抗性前列腺癌(castrate-resistant prostate cancer，CRPC)，其患者预后更差、病死率更高[3]。而靶向抑制AR 信号通路的功能依然是CRPC 的重要治疗措施。雄激素在体内作为AR 的主要配体，一直被认为是促进PCa 进展的主要原因[4]。但有临床实验研究[5]发现，PCa 患者根治术后给予雄激素治疗，维持血清睾酮水平在300～375 ng·mL-1，患者肿瘤复发率降低、中位生存期延长。另有研究[6-7]表明，AR信号通路对PCa 的发展具有抑制和促增殖的双向作用。目前，关于雄激素是否可通过调节AR信号通路抑制CRPC 阶段PCa 细胞增殖的研究鲜有报道。本研究采用双氢睾酮(dihydrotestosterone，DHT)对C4-2B 细胞进行处理，探讨DHT对C4-2B 细胞增殖和凋亡的影响及其可能机制，给CRPC 的临床治疗提供实验依据。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    C4-2B 细胞由美国加州大学Davis 分校的AllenC.Gao 教授惠赠；CO2细胞培养箱购于ThermoFisher 公司；DHT 以及渥曼青霉素(wortmannin，WM)购于APExBio 公司；胰蛋白酶、青/链霉素混合液(P/S)、无酚红1640 培养基、一抗稀释液购于北京索莱宝科技有限公司；胎牛血清(FBS)以及磷酸缓冲盐溶液(PBS)购于Gibco 公司；AnnexinVFITC/PI 双染细胞凋亡检测试剂盒购于上海贝博生物科技有限公司；全蛋白提取试剂盒、BCA 蛋白含量检测试剂盒、New-SUPERECL 检测试剂盒购于江苏凯基生物科技公司；B 淋巴细胞瘤2(Bcl-2)、Bcl-2 相关蛋白X(BAX)、裂解型胱天蛋白酶3(cleaved-caspase3 ......