枸杞果多糖对哮喘小鼠巨噬细胞的免疫调节作用
肺部,诱导,1材料与方法,1材料与试剂,2仪器与设备,3实验方法,4细胞实验,5统计学方法,2结果,1各组小鼠肺组织病理变化,2各组小鼠肺总巨噬细胞数量的变化,3各组小鼠肺部M1细胞的占比比较,4巨噬细胞分化形态变化
肖 静, 尹 梅, 高小平, 曲 晨, 赵嘉庆(1.宁夏医科大学基础医学院,银川 750004; 2.宁夏回族自治区医学科学研究所,银川 750004;3.宁夏医科大学总医院心脑血管病医院,银川 750004; 4.宁夏医科大学总医院耳鼻咽喉颈外科,银川 750004;5.宁夏医科大学临床医学院,银川 750004)
枸杞是一种传统的中药,普遍应用于人们的日常保健[1]。可以用来缓解视觉模糊、腹痛、干咳、疲劳、头晕和头痛等症状[2],并且通过抗凋亡、降低DNA 损伤等延缓生物老化,是一种有效的抗衰老剂。枸杞果多糖(lycium barbarum polysaccharide,LBPs)作为枸杞的主要活性成分之一,在生物学上表现为降低血糖和神经保护的功效[3],具有有益健康的生理作用,包括免疫调节、抗病毒和抗氧化的活性[3-4]。
巨噬细胞是机体重要的免疫细胞,当机体发生炎性反应时,巨噬细胞可通过表型转换来调节免疫应答。巨噬细胞以两种极化方式对环境信号作出反应,包括经典的促炎激活(M1)和替代的抗炎激活(M2)[5-8]。M1 巨噬细胞由干扰素-γ(IFNγ)、细菌脂多糖(LPS)或肿瘤坏死因子-α(TNFα)触发,M1 巨噬细胞表达促炎因子,如白细胞介素(IL)-6、IL-1b、诱导型一氧化氮合酶(inducible NOS,INOS)和单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、环氧化酶(COX)-2,促进随后的炎症免疫反应[9-13]。巨噬细胞在机体肺部的表型具有可塑性和复杂性。本课题组前期在动物模型上证实了LBPs 可以通过减轻气道炎症及调节肠道菌群来调节小鼠免疫系统功能,但LBPs 是否具有调节巨噬细胞的功能尚不清楚[14]。炎性反应是一种复杂且高度协调的机制反应,涉及分子、细胞和生理变化,巨噬细胞作为一种固有免疫细胞在炎症发生发展中发挥重要作用[15-16]。本研究以过敏性哮喘小鼠为模型,探究LBPs 对机体巨噬细胞的调节作用,并在LPS 诱导的巨噬细胞炎症模型上进一步探究不同浓度的LBPs 对巨噬细胞的免疫调节作用。
1 材料与方法
1.1 材料与试剂
LBPs(含量为31%,浓度为1 200 mg·mL-1)由森淼公司提供;异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate,FITC)标记的F4/80、藻红蛋白(phycoerythrin,PE)-Cy7 荧光素(PE-Cy7)标记的CD11b,购自eBioscience;流式抗体PE 标记的F4/80、别藻蓝蛋白(allophycocyanin ......
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