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编号:643678
热暴露对大鼠心脏与肝脏组织细胞凋亡及钟基因Bmal1的影响
http://www.100md.com 2022年6月10日 宁夏医科大学学报 2022年第5期
货号,1材料与方法,1实验动物及分组,2实验仪器及试剂,3血压测量,4制备石蜡切片及HE染色,5实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测,6Westernblot检测,7TUNEL法检测组织凋亡,8统
     常笑语,朱玲勤,张瀚文,邓紫薇,陈丹丹,杨春丽,李光华,

    (1.宁夏医科大学公共卫生与管理学院,银川 750004;2.宁夏医科大学基础医学院生理学系,银川 750004)

    热应激可能造成动物或人生理功能改变[1],增加心血管系统疾病、肾脏疾病和精神系统疾病的发生率[2]。当机体处于高温环境时,心脏负荷加重,若超过代偿能力,会对心脏造成一定程度的损伤[3]。高温暴露可加剧体内脂质过氧化反应,增加自由基生成,造成心脏和肝脏氧化损伤,且呈现时间依赖性[4]。有实验[5]表明,热应激引起肉鸡肝脏蛋白质组学的变化,造成了肝脏的明显损伤。环境中的温度信号会对生物的周期性节律行为产生影响。生物钟基因是在细胞、组织和生物体水平上调节生理昼夜节律所需的基因[6],广泛存在于心、肾、肝、脾等组织中。Bmal1是唯一一个单基因敲除即可引起机体昼夜节律反应完全丧失的核心生物钟基因[7]。在人体心脏,生物钟基因有明显的昼夜节律性,其中波动最明显的是Bmal1基因[8]。有大量研究[9-11]显示,热应激会促进细胞凋亡,主要包括中枢神经系统、消化系统、心血管系统以及生殖系统等的细胞凋亡。一般认为,细胞凋亡发生异常时,机体发生疾病的概率就会增加[12]。然而有研究[13]报道,Bmal1可以降低细胞的凋亡水平。本研究旨在探讨热暴露对大鼠心脏与肝脏组织细胞凋亡及钟基因Bmal1表达水平的影响,为高温从业人员(如农业劳作、消防、军事和采矿等)的健康防护提供参考和指导。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物及分组

    选用20只健康SD雄性大鼠[合格证号:SCXK(宁)2020-0001],体质量(180±20)g。随机分为对照组和热暴露组,每组10只。实验前各组大鼠在24℃环境中适应性饲养1周。对照组和热暴露组大鼠分别在24℃和32℃环境中饲养2周进行实验,饲养环境相对湿度均为(55±5)%。所有大鼠每日自由进食饮水,大鼠分笼饲养,勤换垫料,光照明暗周期12 h/12 h。所有动物实验程序均经宁夏医科大学机构评审委员会批准(批准号:NXMU-2020-326)。

    1.2 实验仪器及试剂

    人工气候舱(ZRS JSW,杭州Pnshar Technology Co.Ltd.),智能无创血压计(Sortron公司)。RNA提取试剂盒(货号:9767)、逆转录试剂(货号:RR036A)和cDNA合成试剂盒(货号:RR820A)购自(Takara)宝日医生物技术(北京)有限公司。苏木精-伊红染色试剂盒购自北京雷根生物技术有限公司;TUNEL试剂盒(货号:T6013 ......

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