王文成，张亚文，马 瑞，张 伟，曹 池，李姝霖，田建英

    (1.宁夏医科大学基础医学院，银川 750004；2.宁夏回族自治区人民医院，银川 750002)

    皮肤老化程度是评估人的年龄的关键决定因素。皮肤老化是皮肤组织退化，表现为皮肤功能和结构衰退，适应性和防御能力下降，包括未出现明显临床病变的老年综合征和衰弱[1]。此外，人的皮肤随着年龄增加，失去弹性变得松弛而下垂[2-4]。皮肤老化与真皮中胶原纤维变性的时序性老化和光老化的累积有关[5]；这可能是年龄因素有关的皮肤老化。随着医疗技术飞速发展，预防皮肤老化是当今研究者的热门话题[6]。近些年，皮肤老化治疗效果取得了一定成效，但其治疗效果维持时间较短。本研究探讨不同年龄大鼠皮肤自然老化中的形态学变化规律及其机制。基质金属蛋白酶由成纤维细胞、巨噬细胞分泌，主要降解胶原纤维和弹力纤维，其在皮肤老化过程中扮演着重要角色。通过皮肤含水量评估皮肤老化程度，揭示皮肤老化的可能机制，为预防皮肤老化、研发抗衰新药物提供科学依据。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物

    SPF级雄性SD大鼠48只，分青年组(4月龄，体质量180～200 g)、中年组(10月龄，体质量360～380 g)、老年组(24月龄，体质量540～560 g)，每组16只，年龄分组依据文献[7-8]；剃干净大鼠背部6 cm×10 cm区域毛发，观察皮肤外观，腹腔麻醉后，冰上每组取8只大鼠背部正中新鲜皮肤1 cm×2 cm，用于做皮肤含水量、生化指标、ELISA、RT-PCR、电镜等实验，其中电镜数据分析参考文献[9]。采用4%多聚甲醛灌注，取大鼠背部正中皮肤1 cm×2 cm固定于4%多聚甲醛中，用于观察皮肤组织形态学变化。SD大鼠/实验场所由宁夏医科大学实验动物中心提供，生产许可证号：SCXK(宁)2020-0001。

    1.2 实验仪器和试剂

    1.2.1 仪器 石蜡包埋机(型号：Histocore Arcadia H；徕卡显微系统公司)，全自动石蜡切片机(型号：RM2265；徕卡显微系统公司)，组织摊片烤片机(型号：TKY-TKA；湖北泰康医疗设备公司)，黏附载玻片及盖玻片(型号：REF.188105；江苏世泰实验器材公司)，电热恒温培养箱(型号：南京牌；南京实验仪器厂)，光学显微镜(型号：BX51；奥林巴斯公司)，透射电镜(型号：H7650；徕卡显微系统公司)，电镜切片机(型号：UC7；徕卡显微系统公司)，全自动样品冷冻研磨仪(型号：JXFSTPRP-CL；上海净信公司) ......