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编号:643683
枸杞多糖减轻雷公藤多苷致卵巢颗粒细胞损伤的研究
http://www.100md.com 2022年6月10日 宁夏医科大学学报 2022年第5期
存活率,卵泡,1材料与方法,2方法,3指标检测,4统计学方法,2结果,1GTW对SVOG细胞存活率的影响,2细胞形态学变化,3对细胞活力的影响,4细胞培养基上清液中AMH水平变化,5对细胞凋亡的影响,6Weste
     楚玉凤,王 静,王 彤,崔瑞琴

    (宁夏医科大学,银川 750004)

    雷公藤为传统中草药中的常用药,性寒,味苦、辛,有大毒,具有通络除痹、祛风活血、除湿止痛等功效。雷公藤多苷(tripterygium wilfordii glycosides,GTW)是最常用的雷公藤制剂之一,是从雷公藤根部提取精制而成的脂溶性混合物,由我国自主研发的免疫抑制药,被誉为“中草药激素”,对自身免疫性疾病、肾系病症、癌症、皮肤病、移植后抗排异等有确切疗效[1]。GTW是一种疗效与毒性并存的药物,即其有效成分和毒性成分为相同物质,临床用药时无法精准区分GTW的治疗与中毒剂量,故GTW在临床应用期间,其毒副作用及不良反应被大量报道,尤其是生殖毒性,严重限制该药的临床使用范围[2]。枸杞多糖(lycium barbarum polysaccharide,LBP)是从枸杞子中提取的水溶性多糖物质,是枸杞生物活性的重要组成成分。LBP有抗衰老、抗氧化作用,可保护心脏、肝脏、神经及生殖系统,还有抗癌、免疫调节作用,对现代医学中辐射或化疗所致的器官毒性也有保护作用[3]。LBP对生殖系统的保护作用主要体现在抑制细胞凋亡、降低氧化损伤及调节人体激素分泌等多个方面[3-4]。本实验通过研究GTW及LBP对人卵巢颗粒(SVOG)细胞增殖与凋亡的影响,探讨GTW对SVOG的毒性作用,以及LBP对该毒性损伤的减毒作用,以期为雷公藤多苷在临床用药的安全性提供重要实验依据。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 细胞来源 SVOG细胞来自宁夏医科大学生育力保持重点实验室。

    1.1.2 药物与相关试剂 得恩德雷公藤多苷片(浙江得恩德制药有限公司),95%浓度LBP(宁夏宏德公司),胎牛血清、1640培养液(Gibco公司),胰蛋白酶消化液(0.25%不含EDTA和酚红)(Solarbio公司),PBS(HyClone公司),CCK8检测试剂盒(苏州优逸兰迪公司),ELISA试剂盒(武汉伊莱瑞特公司),全蛋白提取试剂盒、BCA蛋白定量试剂盒、Annexin-V-FITC/PI流式检测试剂盒(江苏凯基公司),Caspase3、Bax(Abmart公司),Bcl-2(Proteintech公司),β-actin(BIOSS公司),羊抗兔、羊抗鼠二抗(Abbkine公司),ECL显色剂(兰博利德公司)。

    1.1.3 实验仪器 电子天平(先行者,OHAUS公司),WH-861台式震荡器(华利达实验设备公司),离心机(SC-05 ......

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