吴 珊，蒋 丹，徐广贤

    (1.宁夏医科大学临床医学院，银川 750004；2.广东医科大学医学技术学院医学检验系，东莞 523000)

    急性淋巴细胞白血病(ALL)起源于淋巴祖细胞在骨髓、血液和髓外部位的恶性转化和异常增殖，5年的总存活率为45%～90%。ALL的发病率呈双峰分布，第一个高峰发生在儿童时期，第二个高峰发生在50岁左右[1]。尽管诱导化疗的反应率很高，但只有30%～40%的成年ALL患者能实现缓解。长链非编码RNA(LncRNA)IFNG-AS1，又称TMEVPG1或NeST，最初发现是由于小鼠对Theiler病毒反应差异[2]。研究[3]表明，IFNG-AS1调控IFN-γ表达，以及调控Theiler病毒和沙门氏菌的应答。同时，IFNG-AS1在免疫性疾病和肿瘤中高表达，如垂体腺瘤、炎症性肠病、类风湿关节炎、乳腺癌和宫颈癌等。然而，关于IFNG-AS1在ALL中的机制作用研究较少。本研究通过构建IFNG-AS1过表达细胞系，以验证IFNG-AS1过表达的体外效果，以期为ALL发病机制中涉及的靶点提供新的思路。

    1 材料与方法

    1.1 材料与试剂

    急性淋巴细胞白血病jurkat T细胞株源于本实验室保存。RPMI 1640培养基(01-100-1A)和胎牛血清FBS(04-001-1A)购于美国Biological Industries公司；TMT Mass Tagging Kits(90064B)、RevertAid First Strand cDNA Synthesis Kit(K1622)和SYBR Green qPCR Supermix(11733046)均购于美国Thermo Fisher Scientific公司；碘乙酰胺(IAA，144-48-9)、二硫苏糖醇(DTT，16096-97-2)、尿素(57-13-6)、乙二胺四乙酸(EDTA，60-00-4)和硼氢化四乙基铵(TEAB，17083-85-1)均购于美国Sigma公司；可表达绿色荧光蛋白(green fluorescent protein，GFP)的慢病毒购于北京合生基因公司。

    1.2 细胞系、细胞培养和慢病毒侵染

    将jurkat T细胞株置入含5%胎牛血清和1%青霉素/链霉素1640培养基中培养细胞(37℃，5%CO2)。慢病毒侵染jurkat细胞后通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)验证病毒侵染效率。

    1.3 qRT-PCR检测 ......