肥胖2型糖尿病导致小鼠睾丸生精功能障碍的研究
高脂,1材料与方法,1仪器与试剂,2实验动物,3实验方法,4统计学方法,2结果,1高脂饮食对小鼠体质量,血糖的影响,2高脂饮食对小鼠生殖器官质量及脏器系数的影响,3高脂饮食对小鼠精子参数的影响,4高脂饮食对小鼠睾丸
苏亚珊,王强强,王春红,李 健,孙亚群,李广永,吴 际,何 瑞(1.宁夏医科大学基础医学院,生育力保持教育部重点实验室,银川 750004;2.宁夏医科大学总医院,银川 750004)
不孕不育是21世纪仅次于肿瘤和心血管疾病的第3位疾病,在全球范围内,有10%~15%的育龄期夫妇受不孕不育困扰,其中男性因素约占50%[1]。男性不育发生的主要机制是精子发生障碍。精子发生障碍在临床上主要表现为无精子症、少精子症、畸形精子症和(或)弱精子症。少弱精症是指精子数量减少,活力降低,精子形态和功能异常,除先天遗传因素外,吸烟、饮酒、肥胖症、代谢性疾病、心理压力、环境或职业暴露等外在原因都是造成男性不育的潜在危险因素[2]。据报道[3],90%以上的糖尿病患者伴随生殖功能紊乱,体质量指数(BMI)增加与精液质量、浓度以及运动性的下降相关。且母亲受孕时父亲的健康可以通过表观遗传修饰的跨代传播来影响后代的代谢健康和生殖潜力[4]。因此,肥胖及肥胖2型糖尿病对男性生殖功能有重要影响,不仅会导致男性生育能力降低,也会损害子代的健康,但其机制尚不明确。本文通过高脂饮食诱导C57BL/6J小鼠,探寻肥胖2型糖尿病引起的小鼠睾丸生精功能损伤及其机制。
1 材料与方法
1.1 仪器与试剂
电泳仪、免疫印记实验转膜仪(韦克斯(北京)有限公司)、Multiskan GO全波长酶标仪(美国Thermo Fisher公司)、凝胶成像系仪(美国Bio-Rad公司)、超净工作台(苏州安泰空气技术有限公司)、荧光倒置显微镜(德国Bresser公司)、高速台式离心机(上海力申科学仪器有限公司)、高脂饲料(45%fat,D12451;美国Research Diets公司)、普通饲料、BCA蛋白定量试剂盒(江苏凯基生物技术股份有限公司)、化学发光检测试剂盒(苏州宇恒生物科技有限公司)。
1.2 实验动物
16只4周龄15~20 g的SPF级雄性C57BL/6J小鼠,购自宁夏医科大学实验动物中心。小鼠饲养在宁夏医科大学SPF级屏障环境中的实验动物设施IVC系统,自然光源,湿度30%~40%,温度(25±2)℃,噪声水平保持在85 dB以下,所有小鼠自由饮水,自由饮食。所有涉及的动物实验及程序均获得宁夏医科大学医学伦理委员会批准(No.10752309202100057) ......
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