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编号:643666
FSH 抑制大鼠卵泡颗粒细胞Hippo 信号通路促进雌激素合成
http://www.100md.com 2022年7月15日 宁夏医科大学学报 2022年第6期
培养液,磷酸化,纯度,1材料与方法,1实验动物,2主要试剂,3大鼠原代卵泡GCs分离与培养,4HE染色观察大鼠原代卵巢颗粒细胞形态,5免疫荧光检测GCs纯度,6Westernblot检测各组GCs
     陈泰任, 吴梦静, 董玉婷, 孔 斌, 蔡玉芳, 黑常春,吴 凯, 赵承军,2, 常 青,2,3

    (1.宁夏医科大学基础医学院人体解剖学与组织胚胎学系,银川 750004; 2.宁夏生殖与遗传重点实验室,银川 750004;3.生育力保持教育部重点实验室,银川 750004)

    卵泡刺激素(follicle stimulating hormone,FSH)是由垂体的促性腺细胞合成的糖蛋白激素。在卵巢中,FSH 对颗粒细胞(granulosa cells GCs)的生长和雌激素的产生起着重要作用[1-3]。FSH 可以调控芳香化酶(CYP19A1)的表达,CYP19A1 是雌激素产生的关键酶,主要存在于卵泡GCs 中,通过催化作用将GCs 中由卵泡膜细胞合成的雄激素转化为雌激素。FSH 通过许多途径调控CYP19A1的表达,比如通过循环单磷酸腺苷(cAMP)途径调控CYP19A1 的活性等,但是仍然有许多调控途径不是很清楚[4-6]。Hippo 信号通路可以调控细胞增殖和凋亡[7-9]。在卵巢中,当Hippo 信号通路失活时,通路中的MST1/2、LATS1/2 因子磷酸化也被抑制,导致关键因子YAP 进入细胞核与转录因子TEAD 相互作用促进转录,促进GCs 增殖并合成雌激素。相反,当Hippo 通路激活时,会导致MST1/2,LATS1/2 磷酸化,从而引起YAP 因子磷酸化并滞留在细胞质中,抑制GCs 生长与雌激素的合成[10]。因此,课题组以大鼠原代卵泡GCs 为研究对象,探索FSH 是否可通过抑制Hippo 信号通路增强GCs 雌激素的合成。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物

    36 只3 周龄SD 大鼠(SPF 级),由宁夏医科大学实验动物中心提供[动物合格证号:SCXK(宁)2020-0001]。本实验严格按照中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局和中国国家标准化管理委员会发布的《实验动物福利伦理审查指南》进行 ......

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