吕玉珍，喻文琴，马晓薇

    (1.宁夏医科大学，银川 750004；2.宁夏医科大学总医院干细胞研究所，银川 750004；3.宁夏医科大学总医院心脑血管病医院ICU，银川 750012)

    间充质干细胞(mesenchymal stem cells，MSCs)是一类具有多向分化潜能和自我更新的成纤维样干细胞，来源广泛，且不同组织来源的MSCs免疫原性、功能作用都各有侧重[1]。胎盘组织作为MSCs的丰富储库，具有易于分离、无须侵入性操作等优点而被广泛关注[2]。研究[3-6]表明，人胎盘间充质干细胞(human placental mesenchymal stem cells，HPMSCs)在调节炎症、血管反应性和组织修复方面发挥着重要作用。近期发现，HPMSCs旁分泌的外泌体(HPMSCs-Exosomes，HPMSCs-EX)不仅继承了与母体细胞相似的治疗作用，还能避免其栓塞及成瘤等副作用[7]。外泌体是一类体内含有多种DNA、RNA和脂类活性物质的纳米级囊泡[8-10]。研究[11]表明，HPMSCs-EX对于急性肺损伤(acute lung injury，ALI)的治疗具有极大潜力。ALI是一种具有高病死率的破坏性疾病，目前认为[12]人肺血管内皮细胞(human pulmonary vascular endothelial cells，HPVECs)破坏、肺屏障功能降低是ALI的重要发病因素。HPVECs位于血管壁内层，是血液和组织之间的重要屏障[13]。ALI时HPVECs受到打击发生损伤或凋亡、细胞间连接解聚、细胞结构改变、屏障功能降低，同时也会释放炎性因子进一步损害HPVECs[14]，因此HPVECs是损伤的主要靶细胞和活性效应细胞[15]。课题组前期已经证明HPMSCs-EX对HPVECs具有保护作用，但机制尚未阐明[16]。该实验将进一步探讨HPMSCs-EX对HPVECs血管形成和迁移的影响，探索潜在的作用机制，为ALI的治疗提供理论依据。

    1 材料与方法

    1.1 材料与仪器

    HPMSCs来自宁夏医科大学总医院干细胞研究所，无血清培养基购自LONZA公司，血清替代物购自PALL公司，间充质干细胞无血清促贴壁基质胶、成脂肪诱导分化培养基、成骨诱导分化骨培养基、成软骨诱导分化培养基购自STEMCELL公司，Exo-Quick-TC外泌体提取纯化试剂盒购自SBI公司，蛋白浓度测定试剂盒购自凯基生物公司，HPVECs、内皮细胞培养基购自ScienCell公司，PBS、胰酶替代物购自Gibco公司 ......