曾 玥，罗思晴，马鑫喆，潘泓乐，刘红梅，张鸣号，3

    (1.宁夏医科大学，银川 750004；2.宁夏医科大学基础医学院，银川 750004；3.国家卫健委代谢性心血管疾病研究重点实验室，银川 750004)

    帕金森病(parkinson's disease，PD)是老年人群中一种常见的神经系统退行性疾病，以黑质多巴胺能神经元的选择性死亡导致纹状体的多巴胺水平降低为特征[1]。PD的病因和发病机制尚不明确。研究[2]发现，氧化损伤和线粒体功能障碍在PD的发病机制中起着重要作用。活性氧(reactive oxygen species，ROS)产生的增加可以触发线粒体膜通透性转换孔(mitochondrial permeability transition pore，MPTP)的形成[3-4]。MPTP引起线粒体释放促凋亡蛋白，包括细胞色素C(cytochrome C，cyto C)、caspase-9、Smac/DIABLO、核酸内切酶G(EndoG)、凋亡诱导因子(apoptosis-inducing factor，AIF)，引起细胞内钙超载，最终导致细胞死亡[3-4]。AIF是一种进化保守的黄素蛋白，能够诱导caspase非依赖性细胞凋亡。线粒体形态是由细胞器裂变和融合之间的平衡动态控制的[5]，而AIF缺乏可破坏这种动态平衡，从而导致线粒体损伤[6]。作为对促凋亡信号的反应，AIF从线粒体易位到细胞核，并与DNA相互作用，刺激染色质凝结和高分子量DNA碎片化[7]。因此推测，如能减少鱼藤酮诱导的ROS产生、维持线粒体膜电位和抑制AIF产生，将对维持线粒体膜稳定和细胞内环境稳态，减少细胞死亡发挥重要作用。

    环孢素A(cyclosporin A，CsA)是一种通过与Cyp-D结合抑制MPTP的免疫抑制剂，N-甲基-4-异亮氨酸环孢素(N-methyl-4-isoleucine-cyclosporin，NIM811)是一种CsA衍生物。在本实验中，我们研究了NIM811对鱼藤酮诱导的海马神经元细胞死亡的体外影响，通过检测ROS的产生、线粒体膜电位、线粒体cyto C的释放、caspase-9的激活和AIF核易位，阐明NIM811通过抑制MPTP减轻AIF核易位和细胞凋亡的可能机制，为NIM811的神经保护作用和PD的防治提供基础实验依据。

    1 材料与方法

    1.1 资料

    HT22细胞株由夏威夷大学Jun Panee博士提供；DMEM高糖培养基、PBS(GE Healthcare Life Sciences ......