王芳姣，焦 岩，和祯泉，张 燕，张 瑞，余建强，何仲义，杨 巍，李芳芳，牛建国，

    (1.宁夏医科大学基础医学院人体解剖与组织胚胎学系，银川 750004；2.宁夏医科大学颅脑疾病重点实验室，银川750004；3.宁夏医科大学药学院药理学系，银川 750004；4.浙江大学基础医学院生物物理学系，杭州 310058)

    脑缺血是世界范围内导致人类残疾和死亡的主要病因之一，血供不足导致大脑缺少氧气和营养，最终使神经功能缺损[1-2]。恢复脑血供对缓解缺血性脑损伤至关重要，但其可能会进一步加重脑损伤，即脑缺血再灌注(ischemia-reperfusion，I/R)损伤[3]。探索有效预防脑I/R损伤的治疗方法仍是目前临床亟待解决的问题。有研究[4]表明，能够降低卒中后脑梗死体积的治疗往往伴随着反应性星形胶质细胞的减少，提示通过特殊途径促进星形胶质细胞有益功能或降低其有害功能，可能成为改善脑卒中后脑损伤的有效治疗手段。

    瞬时受体电位M2(transient receptor potential melastatin 2，TRPM2)通道是一种非选择性Ca2+通透性阳离子通道[5]，广泛表达于中枢神经系统(central nervous system，CNS)[6]。TRPM2介导的Ca2+传导参与多个生理过程，包括炎性因子释放、小胶质细胞活化和胰岛素分泌等[7]。研究[8-9]表明，敲除或抑制TRPM2基因可减少缺氧缺血性脑损伤后的脑梗死体积，改善感觉运动功能，减少炎性反应。但TRPM2通道是否通过调控星形胶质细胞的活化从而介导脑I/R损伤目前尚不清楚。

    本研究拟利用小鼠脑I/R损伤模型以及原代星形胶质细胞氧糖剥夺再灌注(oxygen and glucose deprivation-reperfusion，OGD/R)模型，探讨造模后星形胶质细胞的活化程度以及TRPM2基因是否参与调控其活化。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物

    实验所用SPF级C57BL/6雄性小鼠由宁夏医科大学实验动物中心提供[动物许可证号SCXK(宁)2020-0001]，TRPM2-/-小鼠(C57BL/6品系背景)由浙江大学动物实验中心提供，小鼠在安静环境下饲养，自由摄食和饮水。选取体质量26～28 g的小鼠进行在体实验；采用C57BL/6和TRPM2-/-的0～2 d新生乳鼠进行原代星形胶质细胞培养取材。

    1.2 主要试剂

    TTC购自美国Sigma公司，异氟烷、线栓购自深圳市瑞沃德生命科技有限公司 ......