马岸文，朱 磊，闫 琰，季 凯，李 芳，韩 磊，孙玉宁

    (1.宁夏医科大学基础医学院生物化学与分子生物学系，银川 750004；2.宁夏医科大学临床医学院，银川 750004；3.宁夏医科大学总医院呼吸及重症监护系，银川 750004；4.银川市妇幼保健院，银川 750001)

    病毒感染是儿童社区获得性肺炎(CAP)的重要病因，严重可危及患儿生命[1]。人副流感病毒(human parainfluenza viruses，HPIV)是常见的儿童CAP的病原[2]，是5岁以下儿童呼吸系统疾病相关住院的常见原因，仅次于呼吸道合胞病毒(RSV)[3]。副流感病毒属于副黏病毒科，是单链包膜RNA病毒，发现于1955年[4]。根据其基因特性和血清学，可分为HPIV-1、HPIV-2、HPIV-3、HPIV-4型[5]。副流感病毒感染后从鼻和口咽开始，在初次感染后2～5 d扩散至下呼吸道并达到复制高峰[6]。HPIV与其他呼吸道病原的合并感染可能导致更复杂和漫长的病程[7]。鉴于缺乏HPIV快速诊断手段及有效的抗病毒治疗药物，常导致HPIV快速传播进而提高其致死率[8]，因此，针对该病毒的流行病学和临床的分析与监测十分重要。本研究对2018—2019年于银川市妇幼保健院因CAP就诊的878份病例采用多重聚合酶连锁反应(polymerase chain reaction，PCR)进行检测，结合临床，分析与总结HPIV在儿童CAP感染中的流行特征及规律，为预防及治疗提供理论依据。

    1 资料与方法

    1.1 研究对象

    选取2018—2019年银川市妇幼保健院因CAP就诊的878例患儿，年龄在14岁以下。所有患者均根据世卫组织的CAP临床标准进行诊断，并制作研究问卷(内容包括：呼吸道症状、年龄、性别、入院时间、诊断和临床症状等)[9]。

    1.2 标本收集

    使用细软的塑料导管抽吸下呼吸道分泌物，立即加入病毒保护液，并做好编号，-80℃以下冰箱保存。

    1.3 病毒检测

    从样本中提取DNA或RNA、逆转录和多重PCR。根据制造商说明书，使用Quick-DNA/RNA Viral Kit试剂盒(Zymo Research，美国)从100μL样品溶液中提取病毒核酸，该试剂盒能够同时提取病毒RNA和DNA；然后用逆转录试剂盒(TransGen Biotech，中国)合成cDNA；最后使用多重PCR试剂盒(Seegene，韩国)检测病毒(PCR仪器：Bio-Rad MJ MiniTM ......