杨晓明，盛思琪，章旭红，杜星辰，马胜超，杨安宁，赵迅霞

    (1.宁夏医科大学基础医学院，银川 750004；2.国家卫健委代谢性心血管疾病研究重点实验室，银川 750004)

    近年来，我国药物性肝损伤(drug-induced liver injury，DILI)的发病率逐年增多，已成为临床常见的引起肝损害的原因之一[1]。对乙酰氨基酚(acetaminophen，APAP)是临床常用的解热镇痛药物，但APAP的过量服用会导致急性肝功能衰竭，甚至死亡[2]。目前，APAP引起肝毒性的机制仍不清楚，因此，探讨APAP引起急性肝损伤的机制，筛选出有效防治DILI的方法有非常重要的临床意义。

    枸杞多糖(lycium barbarum polysaccharides，LBP)是从枸杞子中提取的一种水溶性蛋白杂多糖，其具有抗氧化、抗肿瘤、神经保护、免疫调节等多种药理作用[3]。研究[4]发现，LBP通过下调PXR及药物代谢相关的酶类，减轻邻苯二甲酸二酯引起的肝毒性。LBP也可拮抗染镉大鼠的肝氧化性损伤[5]。本研究以正常人肝细胞(L02)为研究对象，研究LBP对APAP诱导肝细胞损伤的保护作用及可能机制。

    1 材料与方法

    1.1 材料与试剂

    L02细胞(中科院上海细胞库)；LBP(宁夏沃福百瑞生物食品工程有限公司)；APAP(Med Chem Express公司)；RPMI-1640培养基、胎牛血清(Gibco公司)；蛋白提取试剂盒、BCA蛋白含量检测试剂盒(凯基生物公司)；总RNA提取试剂盒、逆转录试剂盒、荧光定量PCR试剂盒(TaKaRa公司)；CCK-8试剂盒(Invigentech公司)；IRE1α抗体(Santa Cruz公司)；eLF2α抗体(Affinity公司)；Bax抗体、Bcl-2抗体(Proteintech公司)；Nrf2抗体、Caspase-12抗体、β-actin抗体(Cell Signaling Technology公司)；引物由上海生工公司合成。

    1.2 主要仪器

    SW-CJ-2F型洁净工作台(苏州安泰空气技术有限公司)；二氧化碳细胞培养箱(德国Thermo Fisher Scientific公司)；倒置相差显微镜(日本Nikon公司)；qTOWER实时荧光定量PCR仪(德国Analytik Jena公司)；电泳仪、化学发光凝胶成像仪系统(美国Bio-Rad公司)。

    1.3 方法

    1.3.1 细胞的培养L02细胞用含10%胎牛血清的Roswell Park Memorial Institute(RPMI)1640培养基 ......