隋 御，王 媛，李元杰，彭 亮，徐 方

    (1.宁夏医科大学基础医学院，银川 750004；2.宁夏医科大学生育力保持教育部重点实验室，银川 750004；3.宁夏医科大学总医院皮肤科，银川 750004)

    结肠癌(cancer of colon)在世界范围是发病率较高的恶性肿瘤之一，我国结肠癌发病率和死亡率均呈上升趋势，2020年全球癌症统计显示，我国结肠癌新发率和死亡率分别居恶性肿瘤第三和第五位[1]。目前对结肠癌的治疗以手术为主、化放疗为辅[2]。铂类药物由于其药物活性高、治疗效果好，可以和其他抗肿瘤药物联合使用，因此在肿瘤治疗领域得到广泛应用。但肿瘤细胞对于铂类药物的耐药性也越来越被人们关注。近年来通过研究肿瘤细胞对铂类抗肿瘤药物的耐药机制，来降低其耐药性，提高肿瘤的治疗效果。

    DNA聚合酶ι(DNA polymerase iota，polι)作为Y家族DNA聚合酶中保真性较低的基因，其复制保真度比高保真DNA聚合酶低103~104倍[3]，低保真度的积累会导致基因突变，进而诱导肿瘤的发生。有研究[4]证实，polι基因在消化道肿瘤细胞中表达活跃，该基因与肿瘤细胞的耐药性也有一定的关联性[5]。本研究通过RNA干扰技术下调人类结肠癌肿瘤细胞SW480中polι基因的表达，并结合肿瘤治疗药物奥沙利铂，探讨polι基因与肿瘤治疗药物联合作用对肿瘤细胞增殖与凋亡的影响，为肿瘤临床治疗提供前期理论支撑。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    人类结肠癌细胞SW480采购于中科院上海细胞库，细胞培养使用含10%胎牛血清与1%青-链霉素的1640培养液，于5%CO2、37℃的无菌培养箱中常规培养。胎牛血清购自Biological Industries公司，1640培养基购自Gibco公司，RNA干扰用的Lipofectamine RNAiMAX试剂购自赛文公司，目的基因及对照组所使用的RNA干扰片段由上海生工技术有限公司设计并合成，目的基因及管家基因引物由通用生物系统有限公司设计并合成，RNA提取试剂购自全式金生物有限公司，反转录试剂购自TaKaRa公司，定量PCR试剂购自Vazyme公司，Taq DNA聚合酶购自加拿大Fermentas公司，Annexin V-APC/7AAD细胞凋亡试剂盒购自联合生物有限公司 ......