黎 燕，孙志刚，陈利红，周 红

    (1.上海理工大学，上海 200093；2.宁夏启元国药有限公司，银川 750011)

    金莲清热颗粒为《中国药典》(2020年版一部)收载品种[1]，由金莲花、大青叶、石膏、知母、地黄、玄参、苦杏仁(炒)七味中药组成，其中金莲花是该产品的君药之一，主要有效成分为黄酮类和生物碱类物质[2-3]。其中牡荆苷为主要的黄酮类物质，是金莲清热颗粒的有效成分之一[4-5]。《中国药典》将牡荆苷含量作为金莲清热颗粒的质控标准，规定1 g金莲清热颗粒中牡荆苷(C21H20O10)含量不得少于0.32 mg[1]。本研究按照《中国药典》标准方法，检测金莲清热颗粒中牡荆苷的含量，并在此基础上，通过体外酶学实验，探索金莲清热颗粒抑制冠状病毒蛋白酶活性效果。

    1 材料和方法

    1.1 仪器及试剂

    主要仪器：酶标仪(型号：SpectraMax M2e，Molecular Devices公司)；LC-15C高效液相色谱仪(岛津公司)；KQ5200B型超声波清洗机(昆山市超声仪器有限公司)；METTLER TOLEDO ME55电子天平(METTLER TOLEDO公司)；SHZ-D(Ⅲ)循环水式真空泵(上海皓昕机电设备有限公司)。主要试剂：Tris base(Sigma7-9)、EDTA、NaCl、TCEP、BSA等。乙腈、乙酸铵为色谱纯，正丁醇、乙酸乙酯、甲醇、氯仿均为分析纯。

    1.2 实验材料

    1.2.1 受试样品和对照化合物1)受试样品金莲清热颗粒：由宁夏启元国药有限公司提供(样品编号：USST-LY-Y2020-1)，牡荆苷的含量测定选取3个批次样品(200420-1、200420-2、200420-3)。体外酶学实验样品批号：200420-1。配制方法：受试样品在实验当天使用无菌水溶解到800 mg·mL-1，经100℃水浴加热10 min，冷却至室温后取上清液用于测试。2)对照化合物：3CLpro抑制剂(GC376)，来源：TargetMol(批号：T5188-1)，贮存条件：-80℃ ......