李佳琪，马淑琴，赵 枫，付有娟，姚贵香，关素珍

    (1.宁夏医科大学公共卫生与管理学院，银川 750004；2.宁夏环境因素与慢性病控制重点实验室，银川 750004；3.宁夏医科大学总医院，银川 750004)

    我国女性劳动参与率较高，女性的职业健康受到了越来越多的关注[1]，尤其是女性在妊娠期的特殊生理时期会面临来自工作、生活、社会中各种不良应激事件的心理刺激，不仅对孕妇本身的身体健康产生影响[2]，还会导致宫内环境发生改变从而不利于胎儿发育及后期的成长[3]。肠道菌群(gut microbiota)是肠道特有的微生物群落，通过产生微生物及其代谢物进而影响多种代谢和免疫稳态的功能[4]。孕期应激已被证实可对子代的肠道菌群结构产生影响[5]，但要深入了解肠道菌群和宿主之间的复杂关系，不仅需要了解其结构和功能，还需要进一步了解肠道菌群与代谢物之间的联系，其中短链脂肪酸作为肠道菌群的代谢物能够反映宿主的代谢情况[6]。因此，本研究通过建立孕期慢性应激大鼠模型，观察孕期应激致仔鼠肠道菌群结构和靶向代谢物短链脂肪酸改变，分析子代肠道菌群与短链脂肪酸的关系，进而为孕期应激对子代发育影响的机制研究提供科学依据。

    1 对象和方法

    1.1 实验动物及分组

    本研究选择健康成年SD大鼠，购自宁夏医科大学实验动物中心[合格证编号：SCXK(宁)2015-0001]。其中雌鼠16只，体质量(200±20)g；雄鼠12只，体质量(200±20)g。适应性饲养1周后，将雌鼠随机分为孕期慢性应激组(模型组)和对照组，每组各8只；将12只雄鼠随机分为模型交配组8只和对照交配组4只。其中模型组雌鼠单笼饲养，对照组雌鼠每笼2只饲养；雄鼠每笼2只饲养。本研究经宁夏医科大学实验动物中心实验动物福利伦理委员会审核(IACUCNYLAC-2019-089)。

    1.2 主要仪器与试剂

    131I皮质醇放射免疫试剂盒(北京北方生物技术研究所)；Illumina Miseq PE300测序平台(上海美吉生物医药科技有限公司)；8890B-5977B气相色谱-质谱联用仪(美国Agilent Technologies公司)。

    1.3 方法

    1.3.1 模型构建 (1)模型选择：选择慢性不可预知温和应激(chronic unpredictable mild stress，CUMS)建立动物模型。应激方式包括：①禁食24 h；②24 h拥挤环境(8只合笼)，笼具倾斜30°；③禁水24 h；④24 h潮湿环境(湿度60%～70%)；⑤31℃温水游泳1 h；⑥30 min摇晃(1次/s)；⑦30 min行为束缚；⑧5 min热应激(42℃)；⑨1 min夹尾(距尾尖1 cm处) ......