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编号:265812
氟氯氰菊酯通过cGAS-STING 信号通路诱导肺损伤
http://www.100md.com 2023年5月10日 宁夏医科大学学报 2023年第3期
染毒,肺泡,1材料与方法,1实验试剂,2实验动物与分组,3检测方法,4统计学方法,2结果,1氟氯氰菊酯致大鼠肺损伤的一般指标,2氟氯氰菊酯对大鼠肺病理改变的影响,3氟氯氰菊酯致大鼠肺氧化应激相关指标检测
     宋亚男,倪文思,朱玲勤,王 瑞,孙祎平,杨惠芳

    (1.宁夏医科大学公共卫生与管理学院,银川 750004;2.宁夏医科大学环境因素与慢性病控制重点实验室,银川 750004)

    拟除虫菊酯杀虫剂在全世界范围内普遍用于虫害控制,包括农业、林业甚至家庭,且使用量逐年增加[1]。氟氯氰菊酯是最重要的第二类拟除虫菊酯[2]。氟氯氰菊酯可在动物的大脑、肝脏和其他组织中蓄积,从而对机体造成损伤[2-7]。还有研究[3,8]表明,氯氰菊酯可通过损伤肺泡上皮细胞和血管内皮细胞,引起肺水肿、肺泡炎、肺纤维化等肺损伤,但其具体机制尚不明确。

    肺损伤通常与氧化应激有关,而氧化应激又会导致线粒体损伤[9]。环状GMP-AMP 合成酶(cGAS)-干扰素刺激基因(STING)信号通路的激活在肺炎的发生发展中起着重要作用[10]。线粒体损伤可激活cGAS-STING 通路,从而激活核因子κB(NFκB)释放促炎因子,如肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)等,导致炎性反应,进而引起肺损伤[11-12]。TNF-α 和IL-6 作为重要的促炎因子,过表达可引起肺水肿、充血、纤维化等肺损伤[13-16]。因此,本研究通过建立氟氯氰菊酯致大鼠肺损伤的动物模型,探究氧化应激及cGAS-STING 炎症通路在氟氯氰菊酯致大鼠肺损伤中的作用机制。

    1 材料与方法

    1.1 实验试剂

    氟氯氰菊酯(德国Dr.Ehrenstorfer 公司);金龙鱼牌玉米油;丙二醛(MDA)试剂盒(北京索莱宝科技有限公司);超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒(南京建成生物工程研究所);BCA 蛋白检测试剂盒(江苏凯基公司);全蛋白提取试剂盒(上海碧云天公司);PAGE 凝胶快速制备试剂盒(上海雅酶生物公司);GAPDH、STING 一抗(美国Abcam 公司);ALDH2 一抗(美国Abbkine 公司);cGAS 一抗(美国ABclonal 公司);NFκB 一抗、p-NFκB 一抗、IL-6 一抗、TNF-α 一抗、Goat Anti-Rabbit IgG(中国Affinity 公司);蛋白Marker(美国Thermo Fisher 公司);FastKing 一步法除基因组cDNA 第一链合成预混试剂(北京天根生化科技公司);探针法定量PCR 预混液(美国Promega 公司);TRIzol(美国Invitrogen 公司) ......

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