杨晓莹， 胡东来， 李 元， 杨 华， 楚元奎，2

    (1. 宁夏医科大学临床医学院，银川 750004； 2. 宁夏医科大学总医院医学实验中心，银川 750004)

    前列腺癌(prostate cancer，PCa)是男性最常见的恶性肿瘤之一。2020 年，全球有近140 万PCa 新发病例，37.5 万人因PCa 死亡[1]。在中国男性癌症患者中，PCa 的发病率排名第6(8.16%)，病死率排名第七(13.61%)[2]。目前，前列腺特异性抗原(prostate specific antigen，PSA)筛查[3]结合影像学检查有效地增强了PCa 的临床诊断效果[4]。但雄激素受体的变异和PCa 的耐药及转移等使其诊断、预后和治疗变得更难。因此进一步揭示PCa 的分子发病机制，寻找新的更加有效地诊断和治疗靶点对于PCa 的临床诊治具有积极意义[5]。

    MicroRNAs(miRNAs)是一类非编码RNA，可通过识别靶基因3’-非翻译区的互补序列导致mRNA 降解或抑制蛋白的翻译，包括PCa 在内的一些恶性肿瘤的起始和进展与miRNAs 的异常表达密切相关[6]。miR-30 和miR-214-5p 可抑制前列腺癌细胞的增殖、转移和上皮间充质转化[7-8]。已知miR-3064-5p 在肝癌、胃癌、宫颈癌等多种癌症中表达下调，并发挥抑癌作用[9-11]。作为抑癌分子的miR-3064-5p 在多种癌症中表达下调，其机制尚未见报道。有研究[12]表明，包括DNA 甲基化、组蛋白修饰等在内的表观遗传学修饰调控着癌症进展中抑癌分子的表达。DNA 甲基化修饰可通过增强miRNAs 启动子内CpG 区域的甲基化，导致miRNAs 的表达下调[13-14]。一些抑癌miRNAs，如miR-27a、miR-141 和miR-200C 已被证明在PCa 中呈高甲基化状态[15-16]。

    课题组前期研究[17]证实，miR-3064-5p 在PCa细胞中的表达降低。生物信息学分析发现，miR-3064-5p 启动子区存在CpG 岛，提示其可能受到了DNA 甲基化调控的影响。本研究通过使用去甲基化药物地西他滨(decitabine，DAC)处理PCa细胞，甲基化特异性PCR(methylation-specific PCR，MSP)和qRT-PCR 检测miR-3064-5p 启动子的甲基化状态和表达水平，明确PCa 细胞中miR-3064-5p 的沉默是否与甲基化调控有关，以期为后续miR-3064-5p 的相关抗肿瘤研究提供实验依据 ......