董晓微， 郭 东， 柳 斌， 张俊华， 樊瑞军

    (宁夏回族自治区人民医院临床医学检验诊断中心，银川 750002)

    肝细胞癌占原发性肝癌的95%，居我国恶性肿瘤发病率第3 位，在全球范围内，每年可造成近100 万人死亡[1]。切除、移植、化疗栓塞、乙醇注射和冷冻消融术是治疗肝细胞癌的潜在方法，但仅对小且具有局限性的肿瘤有效[2]。不幸的是，大多数肝细胞癌患者在诊断时已到晚期，目前治疗效果不佳。因此，迫切需要为肝细胞癌研究新的治疗策略。近年来，在癌症治疗中，生物免疫治疗作用越来越突出，抗原提呈细胞之一的树突状细胞(dendritic cell，DC)不仅参与T 细胞的激活、免疫功能的恢复，并可促进相关细胞因子的释放等过程，从而发挥抗肿瘤效果[3]。细胞因子信号抑制因子1(suppressor of cytokine signaling 1，SOCS1)作为细胞因子信号抑制因子(SOCS)家族的一员，近年来得到广泛关注。SOCS1 不仅参与细胞信号传导，而且参与泛素化介导的蛋白质降解过程，与DC 分化、T 细胞功能以及肿瘤进展息息相关，这些功能在肿瘤细胞的生长和增殖中都起着重要作用[4]。微小RNA-618(micro RNA-618，miR-618)能够调节DC 以及T 细胞，作为抗癌免疫治疗的新方法，miR-618 在肝癌中也可能发挥着重要的抑癌因子作用。因此，miR-618 作为SOCS1的靶向miRNA，探究其转录调控和相关功能对DC 表面抗原及其免疫调控的影响，对于指导肝细胞癌临床免疫治疗意义重大。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    采集宁夏回族自治区人民医院2020 年10月至2021 年10 月收治的60 例肝细胞癌患者的外周静脉血，其中男性38 例，女性22 例；年龄52～75 岁，平均年龄(64.45±4.22)岁。通过淋巴细胞分离液离心得到外周血单核细胞(peripheral blood mononuclear cells，PBMC)。PBS 缓冲液、Lipofectamine3000 试剂盒、RPMI 1640 培养基和Gibco Opti-MEM 培养基均购自赛默飞世尔科技(中国) 有限公司；TransScriptⅡGreen One-Step RT-qPCR、SuperMix 试剂盒、TRIzol 试剂盒、RIPA 裂解液、BCA 试剂盒、白细胞介素(interleukin，IL)12、干扰素-α(interferon-α，IFN-α)和肿瘤坏死因子-γ(tumor necrosis factor-γ ......