新芒果苷对小鼠磨损颗粒诱导骨溶解动物模型中炎性骨溶解影响的研究
骨细胞,植骨,气囊,1资料与方法,1主要仪器与试剂,2实验动物,3动物模型的建立与分组,4小鼠植骨气囊组织石蜡切片制作,5苏木素-伊红(HE)染色,6TRAP染色,7免疫组织化学染色,8统计学方法
刘睿喆,陈德胜(1.宁夏医科大学临床医学院,银川 750004;2.宁夏回族自治区人民医院骨科,宁夏医科大学第三临床医学院,银川 750002)
人工关节置换术(artificial joint replacement,AJR)常用于治疗重度骨关节炎、类风湿关节炎、严重关节内骨折等终末期骨关节病,以缓解患者病痛、恢复关节功能[1]。AJR 后无菌性松动、假体周围骨溶解(periprosthetical osteolysis,PPOL)是术后常见的严重并发症[2]。无菌性松动骨溶解的发生主要是由于成骨细胞骨形成与破骨细胞骨吸收所维持的骨平衡状态被打破,植入物-骨界面间产生的磨损颗粒被巨噬细胞吞噬,触发炎症级联反应,核因子κB 受体活化因子配体(receptor activator of nuclear factor kappa B ligand,RANKL)的激活和肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)、前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)等炎性细胞因子的释放,使破骨细胞异常增殖、分化,骨平衡状态被打破,造成关节假体周围的无菌性松动骨溶解[3-4]。新芒果苷(neomangiferin,NG)是一种具有咕吨酮结构的天然多酚类碳苷化合物,来源于芒果叶和知母,是一种单味中药,具有抗氧化、抗菌、抗病毒、免疫调节及抗肿瘤等多方面的生理活性和药理作用。NG 能够参与调控脂肪氧化的基因表达[5]、抑制IL-6 等细胞因子的表达以治疗结肠炎[6]、抑制破骨细胞的分化、抑制骨吸收[7]。然而,NG 对钛颗粒诱导炎性骨溶解的作用和具体机制尚不清楚[8],本研究旨在探讨NG 对小鼠磨损颗粒诱导骨溶解动物模型中炎性骨溶解的作用与机制。
1 资料与方法
1.1 主要仪器与试剂
NG(经高效液相色谱法分析其纯度为98%以上)购自曼思特(成都)生物科技有限公司。钛颗粒购自美国Alfa Aesar 公司,颗粒直径<20 μm。IL-6、TNF-α、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)免疫组织化学检测试剂盒购自杭州联科生物技术股份有限公司;抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)试剂盒购自美国Sigma 公司。
1.2 实验动物
选用45 只SPF 级近交系雌性BALB/c 小鼠(宁夏医科大学实验动物中心提供) ......
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