阮建桥，王 晶，徐 辉，曹相玫

    (1.宁夏医科大学，银川 750004；2.宁夏医科大学总医院病理科，宁夏医科大学第一临床医学院，银川 750004)

    胶质瘤是一种异质性疾病，在成人恶性原发性脑肿瘤中常见，占比为70%，由于具有极强的侵袭性，故预后不佳[1]。根据肿瘤的侵袭性生物学行为以及不良预后将其分为Ⅰ～Ⅳ级，可以为胶质瘤的治疗方案提供指导[2]。异柠檬酸脱氢酶(isocitrate dehydrogenase，IDH) 是参与许多重要代谢过程的关键酶，包括IDH-1、IDH-2、IDH-3亚型，其中IDH-1 突变导致α-酮戊二酸(α-ketoglutaric acid，α-KG)转化为2-羟基戊二酸(2-hydroxyglutarate，2-HG)，其作为癌代谢物是胶质瘤发生的关键驱动因素[3]。在胶质瘤中，绝大多数IDH-1 突变导致组氨酸替代精氨酸(IDH-1 R132H)，IDH-1 突变先于其他分子改变，是胶质瘤发病的早期表现，也是成人胶质瘤的重要鉴别因素，具有预后价值和作为药物靶点的潜力[4-5]。现阶段关于IDH-1 突变对胶质瘤的迁移及侵袭尚不明确。血管生成与胶质瘤快速生长、转移及侵袭密切相关。本研究检测胶质瘤组织中血管生成因子与IDH-1 之间的关系，同时利用强力霉素诱导表达突变型IDH-1 的人胶质瘤U87 细胞，观察其迁移能力，探讨其可能机制，为临床治疗提供参考依据。

    1 材料与方法

    1.1 主要材料

    收集2020—2023 年宁夏医科大学总医院病理科胶质瘤病例198 例，男性112 例，女性86例；年龄≤20 岁者14 例，>20～≤40 岁者50 例，>40～≤60 岁者97 例，>60 岁者37 例。肿瘤分级：Ⅰ级胶质瘤8 例，Ⅱ级胶质瘤56 例，Ⅲ级胶质瘤39 例，Ⅳ级胶质瘤95 例。肿瘤部位：额叶22 例，颞叶39 例，其他部位137 例。实验使用强力霉素(doxycycline)诱导表达mutIDH-1(含IDH-1 R132H)的人脑胶质瘤细胞(U87 细胞)由空军军医大学叶菁教授馈赠，生长方式为贴壁生长，培养基为含1%双抗、10%血清的最低必需培养基(MEM)。

    1.2 实验试剂

    doxycycline 诱导表达体系：1) 含IDH -1 R132H 的慢病毒表达载体为Plvx -IDH -1(R132H)；2)Tet -On 慢病毒表达载体为Plvx -Tet-On；3)doxycycline 诱导剂量为10 μg·μL-1 ......