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编号:1727444
SLC7A11 基因的生物信息学分析及其在热射病大鼠心肌组织细胞中的表达研究
http://www.100md.com 2023年12月14日 宁夏医科大学学报 2023年第10期
糖基化,磷酸化,位点,1材料与方法,1SLC7A11氨基酸序列,2主要试剂与仪器,3生物信息学分析,4实验分组及模型的构建,5Westernblot检测SLC7A11与GPX4的蛋白
     陈丹丹, 武晓敏, 邓紫薇, 李佩玲, 李光华,, 耿 瑶

    (1.宁夏医科大学基础医学院生理学系,银川 750004; 2.宁夏回族自治区人民医院心血管外科,宁夏医科大学第三临床医学院,银川 750004; 3.宁夏医科大学公共卫生学院,银川 750004;4.宁夏医科大学护理学院,银川 750004)

    溶质载体家庭成员7A11(solute carrier family 7 member 11,SLC7A11)基因位于人类第4 号染色体[1],其编码的蛋白SLC7A11 为胱氨酸/谷氨酸反转运体的轻链亚基与重链亚基SLC3A2 组成System Xc-系统,负责维持System Xc-系统的基本转运活性[2-3],合成谷胱甘肽(glutathione,GSH),保护细胞免受氧化应激损伤,对细胞的正常生长尤为关键[4-5]。研究[6]发现,SLC7A11 表达减少,可导致GSH 合成减少、GSH 过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)的活性下降,从而生成大量脂质活性氧,引起细胞发生铁死亡。SLC7A11/GPX4 信号通路是介导铁死亡的核心通路。

    热射病(heat stroke,HS)的发生率和死亡率在全球范围内呈上升趋势,严重危害公众健康[7]。HS 可导致心血管系统发生多种毒性作用,如炎症反应、氧化应激及凋亡[8-9]等,但其完整的发病机制尚不清楚。现阶段,HS 治疗更多的分子机制仍有待深入挖掘。SLC7A11 诱导HS 大鼠心肌铁死亡是否发挥关键作用,是否存在研究潜能有待考究。因此,本研究通过利用各种生物信息学网络平台深入研究SLC7A11 磷酸化、N-糖基化、抗原性和免疫原性等性质,以期预测SLC7A11 受调控的可能潜在性能,并初步通过体内和体外实验探究SLC7A11 在HS 大鼠心肌组织及高温干预的H9C2 大鼠心肌细胞中的表达水平,为后续深入研究并揭示HS 所致心肌铁死亡的潜在分子机制提供理论依据。

    1 材料与方法

    1.1 SLC7A11 氨基酸序列

    从美国国家生物技术信息中心(NCBI)数据库检索人SLC7A11 基因的相关信息,其蛋白登录号为XP_054205473.1。

    1.2 主要试剂与仪器

    SLC7A11 抗体(DF12509,美国Affinity Biosciences 公司)、GPX4 抗体(67763-1-Ig,北京博蕾德生物科技有限公司)、GAPDH 抗体(E-AB-20059 ......

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