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编号:911331
小胶质细胞激活研究中免疫组化和荧光技术的应用
http://www.100md.com 2019年5月10日 健康研究 2019年第2期
微球,室温,1材料与方法,2结果,3讨论
     王羽茜, 张思然, 陈 璐,3, 李成檀,郑 威, 王琼珠, 赵建波, 王艳芳,张丽慧

    (1.杭州师范大学医学院 医学神经生物学市级重点实验室,浙江 杭州 310036;2. 浙江医院 神经内科,浙江 杭州 310013; 3. 常州卫生高等职业技术学校,江苏 常州 213002)

    脑内炎症反应是中枢神经退行性疾病包括帕金森病(Parkinson’s disease, PD)和阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease, AD)以及脑缺血损伤的共同病理过程,在脑损伤的发生发展中起重要作用[1-2]。小胶质细胞是中枢主要的免疫效应细胞,在脑内广泛分布。各种病理刺激可诱导脑内小胶质细胞激活,炎症分子表达和释放增加与神经元变性死亡密切相关[1-2]。在神经炎症过程中,小胶质细胞形态和吞噬功能改变以及炎症分子表达变化需要基于细胞分子基础的直观研究方法。免疫组化(immunohistochemistry, IHC)和免疫荧光(immunofluorescence, IF)结合显微成像分析技术使神经炎症的可视化研究成为可能,已成为神经科学研究的重要方法[3-5]。本研究应用IHC和IF方法结合显微成像技术,监测小胶质细胞激活剂脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导的大鼠脑组织及体外培养的小胶质细胞激活改变,并探讨炎症激活过程中的LPS浓度依赖性。

    1 材料与方法

    1.1 主要试剂与仪器 兔抗离子钙接头蛋白分子1(ionized calcium binding adaptor molecule 1, Iba-1)抗体购于日本Wako公司,羊抗Iba-1抗体购于英国abcam公司,兔抗白细胞介素1beta(interleukin1beta, IL1beta)抗体购于英国abcam公司,异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate ......

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