周 书，许 勇，赫永金，许迪锋，方 良，林祖庆

    (杭州市大江东医院 肝胆胃肠血管外科，浙江 杭州 311225)

    肝细胞肝癌为世界范围内常见的恶性肿瘤之一，位居世界恶性肿瘤发病率的第5位[1]。多种癌症基因或抑癌基因的异常表达，在肝癌的发生、发展及耐药中起着关键作用[2-3]。沉默信号调节因子1(silent information regulator 1，SIRT1)为新近发现的一类依赖烟碱胺腺嘌呤二核苷酸的第Ⅲ类组蛋白去乙酰化酶[4]。在多种成熟组织中表达，胚胎早期即生殖细胞中含量丰富[5-6]。近年来，SIRT1与肿瘤的关系成为肿瘤学研究的热点问题之一，但在肝细胞肝癌中的作用的相关报道尚不多见。有报道显示[7-8]，恶性肿瘤化疗耐药上SIRT1表现出促进、抑制两种现象，我们推测SIRT1的过表达在肝细胞肝癌中的耐药机制中发挥着重要的作用。基于此，本研究通过探讨SIRT1在肝癌组织、细胞中的表达情况，SIRT1过表达与耐药相关蛋白P-糖蛋白(P-gp)、拓扑异构酶Ⅱα(Top-Ⅱα)的相关性，为临床合理用药提供理论指导。

    1 材料与方法

    1.1 组织标本 40例新鲜肝癌组织及匹配的癌旁组织取自刚切除的手术标本，手术后即刻投入液氮保存。分别取部分新鲜组织分离组织蛋白、制作免疫组化切片。

    1.2 主要试剂与仪器 本研究中使用的主要试剂与仪器见表1。

    表1 主要试剂与仪器

    1.3 实验方法

    1.3.1 Western-blot 以研磨法匀浆肝癌组织 ......