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编号:149150
丹参促进人羊膜间充质干细胞增殖的实验研究
http://www.100md.com 2022年5月13日 健康研究 2022年第2期
培养基,1材料与方法,2结果,3讨论
     史恒瑞,董 平

    (1.杭州市丁桥医院 口腔科,浙江 杭州 310022;2.遵义医科大学附属医院,贵州 遵义 563000)

    颌面部位于身体表面,遭遇车祸、外力击打后易受到损伤,影响咀嚼等生理功能,如有面部外形改变亦会导致心理创伤。随着研究的进展,组织工程为修复颌面部组织缺损提供了新的选择。人羊膜间充质干细胞(hAMCs)存在于孕妇产后分娩出的胎盘中,可以分化成来自三个胚层的所有细胞,这些细胞可用来修复颌面部的各类组织缺损。同时,hAMCs具有较强的增殖能力,且较易获取,并具有低免疫原性,异体移植不易引起免疫排斥反应。通过以上特点可预见,该细胞在组织工程修复与重建及细胞替代治疗等再生医学研究领域中具有广阔的应用前景。但hAMCs也存在着一些缺陷,尤其在体外培养时,生长速度缓慢、传代代数有限。所以,如何能高效地扩增人羊膜间充质干细胞就显得尤为重要。

    现代药理学证实丹参有强心、扩血管、抗血栓形成、改善微循环、促进组织再生与修复等良好的作用,其有效成分如丹酚酸、丹参酮都具有抗氧化、降低生物体内氧自由基水平的药理作用。已有多篇文献证实,在体外培养间充质干细胞时给予其类似于体内的低氧环境后,间充质干细胞会保持较原始的状态,增殖能力则会大大增强。基于上述的研究成果及观点,本研究观察丹参是否具有促进hAMCs增殖的能力,为将来更好地将hAMCs应用于组织工程及再生医学中提供实验基础。

    1 材料与方法

    1.1 主要实验材料 人羊膜来源于遵义医科大学附属医院妇产科,经伦理审核、产妇知情同意后,在无菌的条件下从健康足月剖宫产的产妇分娩的胎盘中采集羊膜,将采集到的羊膜置于装有洁净的PBS溶液的玻瓶中,并在2 h内进入实验的流程。

    1.2 主要实验试剂 胰蛋白酶、胎牛血清、L-DMEM,均来自Gibco(USA);胶原酶Ⅱ、L-谷氨酰胺、鼠抗人波形蛋白抗体,购自Sigma(USA);CD45-FITC、CD29-FITC、CD34-FITC、CD166-PE、CD73-PE、CD44-PE ......

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