miR-103对鼻咽癌SUNE1细胞生物学行为的影响
对数,试剂盒,1材料与方法,2结果,3讨论
王显江,程俊亚,陈小丽(嘉兴市第一医院 1.重症医学科;2.急诊科,浙江 嘉兴 314000;3.厦门大学 抗癌研究中心,福建 厦门 361005)
鼻咽癌在我国华南、西南地区的发病率极高,其五年生存率为50%~70%,严重影响我国南方地区人民生活质量[1]。鼻咽癌是一种高侵袭性和转移性的头颈部恶性肿瘤,30%~40%的进展期患者会发生远处转移[2]。因此,研究鼻咽癌细胞侵袭和转移的分子机制对于开发新的鼻咽癌治疗方法十分关键。微小RNA(microRNA,miRNA,miR)是一组进化保守的内源性非编码小分子RNA,能与mRNA特异性结合在转录后水平负性调控基因的表达。近年来大量研究发现,miRNA在肿瘤发生、发展、侵袭转移和代谢中普遍存在表达失调[3]。Wang等[4]对100例鼻咽癌患者进行miRNA检测后发现miR-103在鼻咽癌患者中上调,且其高表达预示预后不良。miR-103能够通过靶向TIMP-3调控wnt/β-catenin信号通路影响鼻咽癌的发生发展[5],Dluzen等[6]研究则证实miR-103能够通过PARP-1调节高血压患者的氧化应激。但miR-103是否会通过PARP-1影响鼻咽癌,目前还没有研究报道。本研究旨在分析miR-103对鼻咽癌细胞增殖、迁移、侵袭等生物学行为的影响。
1 材料与方法
1.1 材料 人鼻咽癌细胞株SUNE1购自中国科学院上海生科院细胞资源中心;RPMI 1640细胞培养基、胎牛血清及0.25%胰蛋白酶购自美国Gibco公司;miR-103模拟物(miR-103 mimic),miR-103抑制物(miR-103 inhibitor)和阴性对照(miR-103 negative control, miR-103 NC)由上海吉玛股份有限公司设计并合成;LipofectaminTM 2000购自美国Invitrogen公司;RNA提取试剂盒、CCK-8分析试剂盒和Annexin V-FITC/PI双染试剂盒购自上海碧云天生物技术有限公司;单克隆抗体cyclinD1、vimentin、PARP-1和GAPDH购自武汉三鹰生物技术有限公司 ......
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