丁梦羽,肖葛琼

    (绍兴文理学院附属医院 肿瘤内科,浙江 绍兴 312000)

    肝癌是世界范围内癌症相关死亡的第4大常见原因,也是发病率和死亡率逐年上升的少数肿瘤之一[1]。常规化疗和放射治疗对肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)的疗效有限[2],HCC患者的五年生存率小于5%[3]。近年来,微小RNA(miRNA)已被验证在多种恶性肿瘤的发生和发展中起显著作用。Piao等[4]发现过表达miR-424-5p可以抑制肝癌细胞增殖,并诱发细胞凋亡。KIF23属于KIF家族,在多个肿瘤组织和细胞中高度表达[5]。已有研究[6]发现,正常肝组织中未检测到KIF23的拼接变异(KIF23 V1和KIF23 V2),却在HCC组织中呈异常表达。KIF23的表达与肝癌的发生发展有关,但KIF23对肝癌的调控机制还不明确。本研究探究miR-424-5p和KIF23在肝癌中的调控机制,以探索新的肝癌靶向治疗途径。

    1 材料与方法

    1.1 细胞培养 正常人肝细胞系HL-7702[L-02](BNCC100012)、人肝癌细胞系HCCLM3(BNCC351888)、MHCC97-L(BNCC337741)均购买于北纳生物。37 ℃、5% CO2的条件下,HL-7702[L-02]细胞培养于含10% FBS的RPMI-1640培养基中,HCCLM3和MHCC97-L细胞培养于含10% FBS的DMEM高糖培养基中。

    1.2 细胞转染 miR-424-5p mimics(miR-mimics)、miR-NC、miR-424-5p inhibitor(miR-inhibitor)、inhibitor-NC以及pcDNA3.1-KIF23质粒(oe-KIF23)和空的pcDNA3.1质粒(oe-NC)均购自Ribobio(中国) ......