1.2 方法

    1.2.1 血液和甲状腺组织RNA的提取 利用Trizol方法提取血液和组织总RAN，组织样本先采用液氮研磨法磨成粉末。在样本中加入相应量的Trizol裂解细胞，取细胞裂解液1 ml，加入氯仿200 μl颠倒混匀，室温孵育5 min，4 ℃ 12 000转离心15 min，取上清，加入异丙醇500 μl，混匀并室温孵育5 min，4℃ 12 000转离心10 min。弃上清，加入无水乙醇1 ml，4 ℃ 12 000转离心10 min。重复上一步骤，弃上清，37 ℃孵育5 min，加入DEPC水30 μl充分溶解RNA沉淀。吸取RNA样品2 μl加入798 μl DEPC水中，于紫外分光光度计测量OD260和OD280处吸光度值，根据OD260值计算RNA浓度，并根据OD260和OD280比值评估RNA质量，比值在1.8～2.0之间认为RNA质量。样品放入-80 ℃保存至使用。

    1.2.2 cDNA的合成 逆转录-聚合酶联反应(RT-PCR)使用TaKaRa试剂 ......