袁铁超，陈国忠，彭振西，易志忠，欧智海

    1.广西中医药大学，广西南宁530001；2.广西中医药大学第一附属医院，广西南宁530023

    胃癌是全世界最常见的消化系统恶性肿瘤之一，由于其发病机制复杂，缺乏有效的治疗措施，导致患者治疗效果不佳，死亡率高[1]。肿瘤细胞的转移历经上皮间质转化(epithelialmesenchymal transition，EMT)、定向侵袭、侵入血液循环等过程[2]。其中EMT是指上皮细胞转化为间质型细胞的生物过程。该过程中原属上皮型细胞经过形态和骨架结构的改变而逐渐舍去细胞极性及胞间连接，获得间质型细胞的特性，且获得侵袭和迁移能力[3]。而肿瘤患者致死率高的主要原因则是癌细胞的迁移、侵袭及转移[4]，因此，阻止或抑制EMT的产生，可以克制肿瘤细胞的迁移和侵袭能力，对患者的预后及治疗有着积极作用。七方胃痛颗粒的功效以益气健脾为主，消积导滞、清肝降逆、活血化瘀为辅。前期研究发现，七方胃痛颗粒可以抑制人胃癌细胞增殖并促其凋亡[5-7]，但其能否影响人胃腺癌AGS细胞上皮间质转化有待进一步证实。因此，本研究就七方胃痛颗粒对人胃腺癌AGS-EMT细胞进行干预，观察干预后对胃癌细胞ZEB2、E-cad及Vimentin的影响，以阐明其对人胃腺癌AGS细胞上皮间质转化的干预作用及机制，为七方胃痛颗粒在临床上推广使用提供有力的依据。

    1 材料

    1.1 人胃腺癌AGS细胞与动物人胃腺癌AGS细胞系购于上海慧颖生物科技有限公司，贴壁生长，置于37℃和5%CO2条件的培养箱中培养。雄性SPF级健康Wistar大鼠40只，体质量100～150 g，购于湖南省长沙市天勤生物技术有限公司，实验动物使用许可证:SCXK(湘)2014-0011。在广西中医药大学实验中心(SYXK桂2019-0001)饲养。实验涉及动物的饲养和实验过程严格遵守广西中医药大学实验动物管理与保护的有关准则，并且严格按照实验动物使用的3 R原则给予人道主义的关怀照顾，且通过广西中医药大学医学伦理委员会审查，伦理审批号:DW20190920-34。

    1.2 药品和试剂七方胃痛颗粒为江阴天江药业有限公司生产的免煎中药颗粒，由广西中医药大学第一附属医院制剂室提供，其组成为生黄芪30 g，白术10 g，茯苓10 g，炙甘草9 g，红参10 g，白芍30 g，炒鸡内金9 g，枳实10 g，木香6 g，黄连6 g，吴茱萸3 g，丹参6 g，中药颗粒被混合搅匀并按每袋8 g的规格灭菌包装。胎牛血清(上海依科赛生物制品有限公司，货号:FCS500)；柠檬酸盐缓冲液(10 mM pH 3.0)(深圳欣博盛生物科技有限公司 ......