中风1号方对急性脑出血大鼠的保护作用及机制研究*
低剂量,脑组织,1材料,2方法,3结果,4讨论
邢锡熙,吴绍钦,沈存思,李建香,王益俊,严晶1.南京市江宁区中医医院,江苏南京211100;2.南京中医药大学第一临床医学院中医儿科学研究所/江苏省儿童呼吸疾病(中医药)重点实验室,江苏南京210023;3.南京中医药大学附属南京中医院,江苏南京210001;4.南京中医药大学第一临床医学院代谢病中医研究重点实验室,江苏南京210023
急性脑出血(acute intracerebral hemorrhage,AICH)约占急性脑血管病的10% ~20%,其发病率、复发率、病死率和致残率高,给社会和家庭带来沉重的负担[1]。除了急性期颅内血肿对脑组织造成压迫,产生占位效应及其分解产物造成脑组织损伤外,继发性的脑水肿和炎症反应等亦会加重脑损伤[2]。西医内科多采用脱水、利尿、降颅压等方法,外科多以清除血肿、去骨瓣降颅压等治法为主,但会遗留除疾病本身以外手术创伤带来的合并症[3]。虽然目前已有一些针对炎症因子的药物,如肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor,TNF-α)抑制剂等,但仍处于试验阶段[4]。中医以辨证论治为基础,复方见长。诸多研究发现,联合中药治疗可显著提高临床疗效[5]。课题组所拟中风1号方具有凉血活血、通腑泄热、开窍通络、上下并治之功,联合应用后临床疗效显著。本文主要观察其对神经损伤、脑水肿、血脑屏障、炎症因子的影响,初步揭示其神经保护作用机制。
1 材料
1.1 动物SD雄性大鼠144只,清洁级,体质量200~250 g,南京市江宁区青龙山动物繁殖场提供[动物合格证号:SCXK(苏)2017-0001],饲养于南京中医药大学动物实验中心。室温23~25℃、相对湿度65% ~70%,饲养环境清洁、安静。大鼠自由饮水、饮食,适应性饲养1周后再进行实验。
1.2 药物及试剂中风1号方由生大黄10 g,生地黄10 g,牡丹皮12 g,三七3 g,全瓜蒌15 g,石菖蒲10 g组成。购于南京市江宁区中医医院中药房,按传统方法煎煮熬制,浓缩至含0.54 g·mL-1生药的药液,调整pH至7.0,无菌操作过滤除菌后,4℃冰箱保存备用。伊文思蓝(Evans Blue,EB)(Solarbio,货号:E8010);大鼠TNF-αELISA试剂盒(福麦斯生物,货号:ELR010);大鼠IL-1βELISA试剂盒(福麦斯生物,货号:ELR002)。
1.3 仪器脑立体定位仪(北京智鼠多宝,型号:DB053);微量进样器(上海高鸽,50μL);酶标仪(优利特,型号:URIT-660);电子天平[赛多利斯科学仪器(北京)有限公司];电热鼓风干燥箱(天津市泰斯特仪器有限公司 ......
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