针刺对帕金森抑郁模型大鼠的影响*
蔗糖,多巴胺,脑组织,1材料,2方法,3结果,4讨论
宋蕙杉,白妍,王顺1.黑龙江中医药大学,黑龙江哈尔滨150040;2.黑龙江省中医药科学院,黑龙江哈尔滨150036
帕金森病(Parkinson′s disease,PD)是一种复杂的中枢神经系统退行性疾病,其病理学特征是黑质内大量多巴胺能神经元进行性缺失变性[1-2]。30%~40%的PD患者伴有以抑郁为主的非运动症状,同时抑郁可以影响运动症状,导致PD的病程加速[3]。PD伴发抑郁症状(Parkinson′s disease with depression,PDD),不仅影响患者生活质量,也给治疗增加了难度[4-5]。脑源性神经营养因子(brainderived neurotrophic factor,BDNF)是对中枢神经系统具有保护作用的神经因子,在皮层、海马区高度表达,能够防止神经元受损凋亡,参与神经细胞的生长分化,对神经元维持正常生理功能发挥重要作用。研究显示[6-8],BDNF参与PDD的发病与病理进程,BDNF的表达下调能够加速多巴胺能神经元损伤及脑组织结构改变,这是导致帕金森伴抑郁样行为的基础。目前对于针刺治疗PDD作用机制的研究较少,本文从BDNF表达方面探讨针刺对PDD的作用机制,现将研究结果报道如下。
1 材料
1.1 动物健康清洁级SD大鼠75只,雄性,8周龄,体质量200~250 g,由辽宁长生生物技术股份有限公司提供,许可证号:SCXK(辽)2018-0001,在黑龙江省中医药科学院动物实验室的动物实验房饲养,室内光暗交替时间为14 h/10 h,温度控制为22~25℃,相对湿度为50%~60%。整个实验过程按照中华人民共和国科技部颁布的《关于善待动物的指导性意见》进行操作。
1.2 药物与试剂阿扑吗啡(apomorphine,APO)(美国西格玛公司,批号:SLBB0077V);6-羟基多巴胺(美国西格玛公司,批号:MKBH3054);水合氯醛(天津市科密欧化学试剂中心,批号:20170305);盐酸氟西汀胶囊(法国Patheon France,批号:J20170022),多巴丝肼片(上海罗氏制药有限公司,批号:SH1001)。BNDF抗体(北京博奥森公司,货号:bsm-33042M);山羊抗兔IgG二抗(北京中杉金桥生物技术公司,货号:ZB-2301);DAB显色剂(北京博奥森公司,批号:6935688);大鼠BDNF ELISA试剂盒(ZIKER子科生物公司,批号:ZK-R3397)。
1.3 仪器Motic Med6.0病理图像分析系统;3000型显微摄影成像系统(美国moticam公司);脑立体定位仪(美国Stoelting公司);微量进样器(哈尔滨凯兴医用器械厂);移液器(Eppendorf公司);电热恒温箱(上海一恒公司);医用微波炉(广东格兰仕集团);全自动多功能酶标仪(美国Bio-TEK公司);高速冷冻离心机(美国BECKMAN公司);电泳仪(上海天能科技公司);RM2135型组织切片机(德国莱卡公司);722型可见分光光度计(上海光学仪器厂);0.25 mm×25 mm针灸针(安迪牌 ......
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