孙艳华，徐建立，李明，曹学彬，董路，孟小晶

    1.沧州市人民医院，河北沧州061000；2.沧县医院，河北沧县061009

    大肠癌是我国最常见的消化道恶性肿瘤之一，发病率仍呈逐年增长趋势，严重威胁着人们的生命健康。近年来，虽然手术技术及化疗方案取得了很大进步，但大肠癌患者术后复发率达40% ～50%，5年生存率仍不足40%[1-3]。而化疗耐药所致化疗敏感性降低是导致大肠癌患者复发的主要因素之一[4-6]。因此，寻找高效化疗增敏剂或许是解决化疗耐药、延长大肠癌患者生命的有效手段。紫草是我国传统中药品种，《神农本草经》《本草纲目》中均有记载，具有清热凉血，解毒透疹之功效。现代药理学研究表明，紫草素具有明显的抗肿瘤活性，对肺癌[7]、肝癌[8]、宫颈癌[9]、子宫内膜癌[10]、乳腺癌[11]等均具有一定的抑制作用，且能提高肺癌H1975细胞对埃克替尼[12]和绒毛膜癌细胞对甲氨蝶呤[13]的化疗敏感性。本研究通过紫草素+奥沙利铂联合干预人大肠癌HT29细胞，并对比奥沙利铂组、空白对照组疗效，研究紫草素对人大肠癌HT29细胞奥沙利铂化疗敏感性的作用及其机制。

    1 材料

    1.1 细胞人大肠癌HT29细胞(中科院上海细胞库)。

    1.2 药品与试剂紫草素(中国食品药品检定研究院，纯度≥98%，批号：110769-201904)；注射用奥沙利铂(江苏恒瑞医药股份有限公司，批号：1812016)；DMEM培养基(高糖)、胰蛋白酶(上海碧云天生物技术有限公司，批号：20190419、20190403)；胎牛血清(杭州四季青生物工程材料有限公司，批号：190527)；CCK-8试剂盒(南京立乔生物科技有限公司，批号：190318)；Annexin-PE/7-AAD细胞凋亡检测试剂盒(美国BD公司，批号：556418)；Bcl-2抗体(上海碧云天生物技术有限公司，批号：201901004)；Bax抗体(上海碧云天生物技术有限公司，批号：201811012)；激活型Caspsae-3多克隆抗体(上海碧云天生物技术有限公司，批号：201812009)。

    1.3 仪器EPICS-XL型流式细胞仪(美国Bcekman公司)；iMark型酶标仪(美国BIO-RAD公司)；BB5060U型CO2细胞培养箱(德国Hereaus公司)；DYY-11型多用电泳仪、DYCZ-40B型转印泳槽(北京六一仪器厂) ......