王兴瑜

    黑龙江中医药大学，黑龙江 哈尔滨 150040

    骨骼肌结节处存在大量高度异常敏感小点即为肌筋膜激痛点(myofascial trigger points，MTrPs)，经触诊发现该处存在一条紧绷肌带[1]。隐性激痛点在受到创伤、免疫力下降、疲劳、机体姿势长期失衡及营养物质缺乏等刺激会转化为活化激痛点，从而导致关节功能受限、骨骼肌疼痛、自主神经功能紊乱及感觉异常等，甚至导致患者肢体功能丧失[2]。已有学者指出，对MTrPs进行针刺可起到灭活作用，通过观察患者疼痛改善情况、疼痛阈值、关节活动度及焦虑、抑郁指数等进行多方面证实，确定针刺MTrPs可起到良好效果[3]。采用体外冲击波干预，同样可起到治疗肌筋膜疼痛的作用。虽然已有大量学者投身于镇痛激痛点的研究，但关于该治疗的机理仍无统一定论，且现有研究主要集中在组织形态学及肌电生理学方面，关于分子生物层面的研究相对较少[4]。体外冲击波的治疗机制虽已明确，但是关于体外冲击对激痛点是如何发挥作用的研究却相对较少。本研究通过制备大鼠MTrPs模型，采用不同方式进行干预，分析针刺及电冲击波对大鼠海马Smad4和TGF-β1蛋白表达的影响。

    1 材料

    1.1 动物6周龄SD雄性大鼠60只，体质量220～250 g，由上海杰思捷实验动物有限公司提供，许可证号：SYXK(沪)2014-0002。饲养条件：温度20～25 ℃，相对湿度40%～70%，每日保持12 h的固定明暗周期。

    1.2 试剂Smad4抗体(美国Abcam公司，批号：XY-E30413)；转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)抗体(美国Abcam公司，批号：XY-E30026)；BCA蛋白浓度测定试剂盒(美国ThermalScientific公司，批号：BC-WB-005-500T)；Trizol(美国Invitrogen公司，批号：15596-026)；RNA-freeWater(德国QIAGEN公司，批号：129112)。

    1.3 仪器MutiscanGo型全波长酶标仪(Thermo公司)；TissueRuptor型匀浆器(北京鼎昊源公司)；GIS-1600型凝胶成像系统(上海天能科技有限公司)；电泳槽和电泳仪(美国BIORAD公司)；热循环仪(美国LIFE公司)。

    2 方法

    2.1 模型制备与给药大鼠适应饲养1周后进行模型制备 ......