鱼腥草提取物对慢性阻塞性肺疾病急性加重期大鼠肺功能的影响及对TLR4/NF-κB信号通路的调控作用*
低剂量,1材料,2方法,3结果,4讨论
李慧,邢学勇,王一新,杨爽,赵丽,郭俊华1.新乡医学院第三附属医院,河南 新乡453000;2.河南大学,河南 开封475000
慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)是一种气流受限、伴有气道高反应性的呼吸道疾病,表现为肺功能下降,对患者生存质量造成严重影响[1]。COPD发病过程复杂,易受环境有害气体或颗粒影响而急性发作,气道、肺实质等发生炎症病变,若不及时有效干预则可能造成肺功能持续下降,导致患者呼吸衰竭而死亡[2-3]。寻找有效治疗手段对COPD急性发作期的治疗有重要意义。COPD中医治疗日渐受到关注[4-5]。研究表明,鱼腥草具有多种潜在药用价值,其提取物中含有多种活性成分且均具有显著的抗炎作用,与地塞米松抗炎能力相近[6]。目前,鱼腥草多用于辅助治疗支原体肺炎、支气管哮喘等肺部炎症性疾病[7],但关于其对COPD急性加重期炎症抑制作用及呼吸功能的影响报道较少。本研究观察鱼腥草提取物对COPD急性加重期大鼠模型肺功能的影响,并探讨其抗炎机制,以期指导临床用药。
1 材料
1.1 动物SPF级雄性健康Wistar大鼠50只,6周龄,体质量180~220 g,购自北京华阜康生物科技股份有限公司,许可证号:SCXK(京)2017-0007,饲养于12 h/12 h明暗交替,23~25℃,40%~50%湿度下,所有动物实验操作符合动物伦理学要求。
1.2 药物与试剂鱼腥草(北京同仁堂股份有限公司),100 g鱼腥草加入3倍体积蒸馏水煎煮两次,合并两次煎煮液,蒸发浓缩至100 mL,有效含量为1 000 g·L-1,使用前用蒸馏水稀释至相应浓度。肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)ELISA试剂盒(美国 R&D Systems公 司,批 号 分 别 为:ML1421、M6000B、MLB00C);兔抗大鼠Toll样受体4(toll-like receptor 4,TLR4)、核转录因子κB(nuclear factorκB,NF-κB)多抗、山羊抗兔单抗(美国Invitrogen公司,货号分别为:48-2300、46-2725、41-3850);
1.3 仪器AniRes2005型实验用小动物肺功能测定仪(北京贝兰博科技有限公司);QuantStudio 3型实时荧光定量PCR仪(美国ABI公司);CheniDoc XRS型化学发光成像分析仪(美国Bio-rad公司) ......
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