李素素，濮文渊，凌云，马俊杰，孙松娴，张静远，周春祥

    南京中医药大学，江苏 南京 210046

    肝癌是世界公认的恶性疾病，是全球癌症死亡的第三大原因[1]，其死亡率居我国消化道恶性肿瘤死亡率之首[2]。中医无“肝癌”病名，但“鼓胀”“癥瘕”“肝积”等与其相似。近年来研究发现[3]，肝癌的发生发展和肠道菌群的失调密切相关。中医药可改变肠道微生态环境，调节肠道菌群和胆汁酸的异常代谢，进而提高机体的免疫力，促进抗肿瘤免疫过程[4]。本课题组前期研究发现，三物白散可升高肝癌皮下种植瘤小鼠血清中白细胞介素-2(interleukin-2，IL-2)、降低白细胞介素-4(interleukin-4，IL-4)水平，逆转Th1/Th2漂移，改善免疫抑制状态，实现肝癌免疫的正向调节作用[5]。三物白散最早见于《伤寒论》，是温下通腑法的经典方剂，方中巴豆通利二便，可显著改善肠道菌群结构[6]，影响肠道免疫和微生物环境的稳态，而法尼醇X受体(farnesoid X receptor，FXR)是保持肠道免疫和稳态的重要调节因子，FXR的表达和肝癌的发生率有一定相关性，FXR可抑制IL-2、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)和干扰素-γ(interferon-gamma，IFN-γ)等Th1细胞因子的mRNA的表达[7-8]。肠道菌群的变化可引起胆汁酸代谢的改变，胆汁酸循环入肝，用抗生素和胆汁酸赘合物-消胆胺干预肝癌小鼠，可引起Th1细胞因子对肝癌免疫应答的正向调控[9-10]。三物白散逆转Th1/Th2漂移实现抗肝癌免疫的机制可能与FXR的表达、肠道菌群及胆汁酸代谢等因素有关。为证实此推测，本研究用三物白散、抗生素和消胆胺作为干预药物，观察各组肝癌小鼠血清及肝脏中Th1/Th2、肠道菌群、回肠中FXR表达，以期深入探讨三物白散抗肝癌的机制。

    1 材料

    1.1 动物及细胞雄性SPF级4周龄ICR小鼠46只，体质量18～22 g，购于南京市江宁区青龙山动物繁殖场，动物许可证号：SCXK(苏)2017-0001，合格证号：201920801，伦理批号：201906A035。小鼠肝癌细胞H22细胞(南京拜睿生物科技有限公司，货号：BR0661)。

    1.2 药物及试剂三物白散(由巴豆、桔梗、贝母三味药组成，安徽药信药业有限公司，批号：20180908)；消胆胺(南京厚生药业有限公司，批号：190301)；注射用盐酸万古霉素(浙江医药股份有限公司新昌制药厂，批号：612D021) ......