马璐璐，陈璐，张璐莎，方乐玉，李春晓，张丽媛，杨文杰，王倩怡，王虹

    天津中医药大学，天津301617

    丹参为唇形科植物丹参Salvia miltiorrhiza Bge.的干燥根及根茎，为活血化瘀要药[1-4]。丹酚酸A(salvianolic acid A，SAA)是丹参中一种主要的水溶性酚酸类化合物，其在心、脑血管病的治疗方面具有重要的研究价值[5-8]。研究表明，SAA可以通过抑制血小板活化达到抗凝血的效果[9]，血小板表面过敏毒素C3a受体(anaphylatoxin C3a receptor，C3aR)属于固有免疫系统中的补体成分，过敏毒素C3a与其关联的G蛋白偶联受体C3aR结合后，促进内皮通透性，募集和激活中性粒细胞，触发炎症反应和血栓形成[10-11]。SAA可以治疗临床缺血性疾病，且可能参与过敏毒素受体C3aR的表达，因此本研究构建体外血小板和中性粒细胞活化模型，通过比浊法、流式细胞术、免疫荧光技术、酶联免疫吸附测定法等检测相关基因和蛋白的表达，探讨SAA是否通过调控C3aR的表达抑制血小板活化、聚集、黏附及中性粒细胞脱颗粒治疗临床缺血性疾病，以期为临床上治疗缺血性疾病机制研究提供思路。

    1 材料

    1.1 动物SD大鼠，SPF级，雄性，40只，体质量200～220 g；C57BL/6小鼠，SPF级，雄性，6～8周，40只；以上动物购于斯贝福(北京)生物技术有限公司，动物许可证号：SCXK(京)2016-0002，饲养于温度19～25℃，相对湿度40%～60%的环境下。

    1.2 药物及试剂丹酚酸A(纯度>99%，成都德思特生物技术有限公司，批号：DST180201-008)；阿司匹林肠溶片(Asprin，每片0.1 g，拜耳医药保健有限公司，批号：BJ27810)；二磷酸腺苷二钠盐(adenosine diphosphate，ADP，美国Sigma-Aldrich公司，批号：SLBN0134V)；罗丹明标记的鬼笔环肽(美国Thermo Fisher Scientific公司，批号：R415)；APC anti-mouse/rat CD62p antibody(美国Biolegend公司，批号：148304)；水合氯醛(成都市科龙化工试剂厂，批号：P1110)；小鼠中性粒细胞提取试剂盒(天津市灏洋生物制品科技有限责任公司，批号：LZS1091)；髓过氧化物酶(myloperoxidase，MPO)试剂盒、弹性蛋白酶(elastase ......