陈进芬，刘平，陈静，吴志勇，华清泉，王兰

    1.应城市人民医院，湖北 应城432400；2.武汉大学人民医院，湖北 武汉430000；3.武汉科技大学附属医院，湖北 武汉430000

    鼻咽癌是一种位于鼻咽部的上皮恶性肿瘤，在世界范围内仍保持较高的发病率[1]。鼻咽癌具有局部侵袭和早期远处转移的特点，遗传易感性、Epstein-Barr病毒(EBV)感染和环境因素是鼻咽癌的三大主要诱因[2]。目前，对于局部晚期的鼻咽癌，化学疗法、放射疗法无疑是标准的治疗方法，可将病死率降低18%，并将5年总生存率提高4～6%[3]。虽然鼻咽癌对放疗和化疗很敏感，但由于其具有很高的转移潜能，30～40%的鼻咽癌患者会在4年内发生远处转移，因此这些治疗方法的有效性受到严重影响，这也是鼻咽癌治疗失败的主要原因[4]。减少复发和预防转移是鼻咽癌成功治疗的关键。目前鼻咽癌的病理分子机制尚不清楚，了解鼻咽癌的病理机制，寻找新的治疗药物是非常必要的。木犀草素是黄酮类化合物家族中的一员，通常以糖基化形式存在于草本植物木犀草中。木犀草素可直接诱导大量人类癌细胞凋亡[5-7]，并提高癌细胞对化疗或生物治疗药物的敏感性[8]。大量研究表明，木犀草素具有抗肿瘤的潜力，但其对鼻咽癌的作用及确切潜在机制仍不清楚。本研究探索木犀草素对鼻咽癌CNE1细胞生长、运动和肿瘤干细胞样特性的影响以及是否存在ERK1/2和p38 MAPK信号通路的参与，检测该通路相关蛋白的表达情况，从而确定新的治疗靶点，以期为木犀草素应用于鼻咽癌的防治提供实验依据。

    1 材料

    1.1 细胞CNE1细胞株(中国科学院典型培养物保藏委员会细胞库，GDC0208)，培养于含10%胎牛血清的DMEM培养基中，放置于37℃、5%CO2培养箱中培养。

    1.2 试剂与药物DMEM培养基、胎牛血清、胰酶、B27、bFGF、EGF(美国Gibco公司，批号：11039021、12483020、15400054、12587010、13256-029、PHG0311)；RIPA裂解液(P0013HD，碧云天，上海)；二喹啉甲酸BCA蛋白浓度测定试剂盒(PA115，天根生物公司，北京)；5-ethynyl-2′-deoxyuridine(EdU)检测试剂盒(C00053，锐博生物，广州)；MatrigelTM底膜基质(3356234，BD公司，美国)；Super RT cDNA试剂盒(CW0741M，康为世纪，北京)；Quantifast?SYBR?Green PCR Kit(204054 ......