微调3号方调控巨噬细胞表型转化对HT-29细胞侵袭能力的影响*
批号,机体,1材料,2方法,3结果,4讨论
赵璐,倪依群,尤建良南京中医药大学附属无锡市中医院,江苏 无锡 214071
研究发现,长期处于慢性应激状态的肿瘤患者,机体会释放大量肾上腺素(epinephrine,E)、去甲肾上腺素(norepinephrine,NE)、皮质醇等激素至外周血中。其中,NE对机体免疫功能的影响已受到学者们的广泛关注,作为一种经典的神经递质,NE可通过β-肾上腺素能(β-adrenergic receptor,β-AR)信号通路改变肿瘤的生物学行为和肿瘤所处的微环境,提高肿瘤细胞的迁移和侵袭能力[1]。而长期反复应激会促使NE的释放从而致使机体炎症和免疫功能发生改变,甚而影响到个体健康状态。无论是交感神经释放的NE,还是自身受到脂多糖刺激后分泌的NE,都使巨噬细胞处于一个富于NE的微环境中。而在肿瘤微环境中存在两类生物学特征完全不同的巨噬细胞,一类为发生经典极化(classical polarization)的M1型,另一类为替代极化(alternative polarization)的M2型,M2型巨噬细胞可抑制细胞免疫应答,促进血管生成因子、金属基质蛋白酶、生长因子等的释放,从而影响肿瘤的增殖与转移[2]。
中药复方制剂微调3号方(WD-3)为微调平衡理论的基本方[3],我科前期大量的临床及实验研究证实,WD-3具有延长晚期肿瘤患者生存期,改善生存质量及抗肿瘤转移的作用[4-6],但其作用机制尚不明确。本实验将观察NE和WD-3药物血清对巨噬细胞表型转化及其对结肠癌细胞侵袭能力的影响,从而探讨WD-3抗肿瘤转移可能的作用机制。
1 材料
1.1 实验细胞与动物人单核细胞白血病细胞(human monocyte leukemia cells,THP-1,细胞目录号:TCHu 57)、人结肠癌细胞株(human colon cancer cell,HT-29,细胞目录号:TCHu103),购自中国科学院细胞库。
SPF级健康雄性SD大鼠20只,6月龄,体质量250~280 g,购自上海斯莱克实验动物中心,许可证号:SCXK(沪)2012-0002,常规饲料喂养,自由饮食饮水。实验方案经过南京中医药大学附属无锡市中医院伦理委员会审查。
1.2 药物与试剂微调3号方(WD-3)由党参、茯苓、猪苓、薏苡仁、白术、陈皮、枇杷叶等组成,为无锡市中医医院院内液体制剂{苏食药监注[2005]401号,苏药制字204002111}。RPMI-1640细胞培养基、DMEM培养基、胰蛋白酶、胎牛血清(fetal bovine serum ......
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