化腐再生法调控iNOS、IL-1β、CD16的表达促进糖尿病大鼠筋之血化*
免疫组化,创面,阳性,1材料,2方法,3结果,4讨论
孙旭,孙瀚驰,徐强,朱朝军,刘潇鸽,宋子豪,李萌,刘振雷,张朝晖1.天津中医药大学,天津 301617;2.天津中医药大学第二附属医院,天津 300250
糖尿病足破溃经常深达肌腱,且感染会沿着肌腱蔓延,患者被迫截肢甚至失去生命。因此,糖尿病足溃疡中对于肌腱的感染处理是治疗成功与否的关键。临床发现,经化腐再生治疗后,变性但尚未失去活性的肌腱表层上可见散在分布的新生肉芽岛,并逐渐生长,最终暴露的肌腱被新生的肉芽组织覆盖,称之为“筋之血化”[1-2],经过此过程后创面逐渐愈合。前期的研究发现,筋之血化的出现是建立在糖尿病足创面微环境稳态形成之后,能加速创面愈合[3-7]。在前期研究的基础上,本文通过观察诱导型一氧化氮合成酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、CD16的表达,以期了解筋之血化过程的变化规律,对于提高糖尿病足创面修复水平,丰富中医外治理论提供科学依据。
1 材料
1.1 动物30只SPF级SD大鼠,雌雄各半,体质量(250±20)g,由中国人民解放军军事医学科学院实验动物中心提供,许可证号:SCXK-(军)2014-2018,实验伦理审查号:20180929004。动物饲养在温度(20±3)℃,湿度37%~48%,12 h/12 h明暗交替的环境下,正常饮食饮水。
1.2 药物与试剂橡皮生肌膏[药物成分:象皮(制)、血余、龟甲、地黄、当归、石膏、炉甘石、蜂蜡,天津达仁堂京万红药业有限公司,国药准字:Z12020345];复方菠萝蛋白酶撒布(汕头市橄榄枝制药有限公司,规格:100 g·L-1,国药准字:H44024825);德湿洁水胶体伤口敷料(德国保赫曼公司,国械注进:20172641570);医用凡士林油纱条(河南新飘安高科股份有限公司,国械注准:20153640846);链脲佐菌素(streptozotocin,STZ,美国Sigma公司,货号:S0130);注射用青霉素钠[华北制药集团动物保健品有限责任公司,规格:2.4 g(400万单位),兽药字:(2015)030201248]。iNOS、IL-1β、CD16 ELISA试剂盒(加拿大Hermes Criterion Biotechnology公 司,货 号:RH0012、RH0053、RH0026);磷酸盐缓冲液(phosphate buffered saline,PBS)、乙二胺四乙酸(ethylene diamine tetraacetic acid ......
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